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      ELISA結合物的定量測定
    1. 發布日期:2025-03-17      瀏覽次數:9
      •   ELISA結合物的定量測定:
         
          一般是對結合物中的酶和IgG進行定量測定。常用紫外分光光度計于403nm和280nm進行測定,然后按下列公式計算:
         
          酶量(mg/ml)=OD403×0.42
         
          IgG量(mg/ml)=(OD280-OD403×0.4)×0.94×0.62
         
          對于過碘酸鈉氧化法制備的標記抗體量,按下列公式計算:
         
          IgG量(mg/ml)=(OD280-OD403×0.34)×0.62
         
          已知酶量和IgG量后,即可計算出標記抗體的摩爾(mol)比值。
         
          HRP/IgG摩爾比值=HRP(mg/ml)/IgG(mg/ml)×4
         
          結合物中酶總量=HRP(mg/ml)×結合物溶液量
         
          結合物產率=結合物中酶總量/標記時加入的酶量×100%
         
          用于ELISA的結合物的酶量為400(g/ml時效果一般,為500(g/ml時效果較好,達 1000(g/ml時效果好。mol.比值由于結合物中含的IgG并不wan全可靠,所以不能作為主要參數。一般認為mol.比值為0.7時效果一般,1.0時效果較好,1.5-2.0時最好。酶結合率為 7%時效果一般,為9%-10%較好,達30%以上時最好。
         
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