無論是對試驗的硬件條件還是對試驗的操作人員的技能要求，ELISA的試驗操作所要求的條件是比較嚴(yán)格的，稍有不慎，前功盡棄。
1、如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，核算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。
2、濃洗刷液或許會有結(jié)晶分出，ELISA試劑盒稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗刷時不影響效果。
3、封板膜只限一次性運(yùn)用，以避免交叉污染。
4、各步加樣均應(yīng)運(yùn)用加樣器，并經(jīng)常校正其正確性，以避免實驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)目多，舉薦運(yùn)用排槍加樣。
5、嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，ELISA試劑盒實驗效果斷定有必要以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
6、從冷躲環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可運(yùn)用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝進(jìn)密封袋中保存。
7、一切樣品，洗刷液和各種廢棄物都應(yīng)按感染物處理。
8、本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。
9、假設(shè)ELISA試劑盒樣品不立即運(yùn)用，應(yīng)將其分紅小部分-70℃保存，防止重復(fù)冷凍。盡或許的不要運(yùn)用溶血或高血脂血。假設(shè)血清中很多顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱凍住。應(yīng)在室溫下凍住并確保樣品均勻地充沛凍住。
