在測定時，受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。

　　由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應的結果，使測定方法達到很高的敏感度。ELISA試劑盒可用于測定抗原，也可用于測定抗體。

　　完整的elisa檢測試劑盒包含以下各組分：

　　（1）已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；

　　（2）酶標記的抗原或抗體（結合物）；

　　（3）酶的底物；

　　（4）陰性對照品和陽性對照品（定性測定中），參考標準品和控制血清（定量測定

　　中）；

　　（5）結合物及標本的稀釋液；

　　（6）洗滌液；

　　（7）酶反應終止液。

　　注意事項：

　　1、當混合蛋白溶液時應盡量輕緩，避免起泡。

　　2、洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。

　　3、一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，使用排槍加樣。

　　4、請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。

　　5、如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數。

　　6、在配制標準品、檢測溶液工作液時，請以相應的稀釋液配制，不能混淆。

　　7、底物請避光保存。

　　8、不要用其它生產廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。