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      J774A.1小鼠單核巨噬細胞

      更新時間:2024-11-16

      簡要描述:

      J774A.1小鼠單核巨噬細胞公司正在出售的產(chǎn)品:CNE-2Z(人鼻咽癌細胞) 5×106cells/瓶×2 兔子白介素10(IL-10)ELISA 試劑盒 IgM/PE-CY5 PE-CY5標記的小鼠抗兔IgM 0.1ml
      Phospho-FoxO3a (Ser253): 0酸化叉頭蛋白3A抗體 大鼠小神經(jīng)膠質(zhì)細胞(RM)(5×105)
      人羊膜細胞;WISH 兔子白介素1(IL-1)ELISA

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      公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!



      1、細胞傳代:

      1)細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時,棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細胞一次;

      2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入 5ml 培養(yǎng)

      液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;

      3)棄上清,沉淀細胞用 1-2ml 培養(yǎng)基重懸,然后按 1:2 比例進行分瓶傳代,最后放入 37℃,5%CO2細胞

      培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

      產(chǎn)品名稱

      規(guī)格

      貨號

      J774A.1小鼠單核巨噬細胞

      1×106

      P-X1063

      一、商品介紹:

      產(chǎn)品名稱

      J774A.1小鼠單核巨噬細胞

      種屬

      小鼠

      細胞別稱

      J-774A.1; J774.A1;   J774 A1; J774A.1; J 774A.1; J774 A.1 ;小鼠單核巨噬細胞

      年齡性別

      成年

      生長特性

      貼壁生長,不用消化

      組織來源

      單核巨噬細胞

      細胞形態(tài)

      單核細胞/巨噬細胞樣

      背景簡介

      J774A.1細胞來源于BABL/cN小鼠,有抗體依賴的吞噬作用,生長受硫酸葡聚糖、PPDLPS的抑制;J774A.1細胞可產(chǎn)生IL-1β和大量的。

      生物安全等級

      1

      細胞規(guī)格

      1×106

      支原體檢測

      基因表達情況


      保藏機構(gòu)

      ATCC; TIB-67 DSMZ;   ACC-170 ECACC; 91051511

      培養(yǎng)基

      90% DMEM+10% FBS+雙抗

      培養(yǎng)條件

      氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37

      凍存條件

      無血清凍存液,液氮儲存

      倍增時間

      ~17小時

       

      2、細胞凍存:

      1)細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時,棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細胞一次;

      2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終

      止消化,輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;

      3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細胞,并放置于凍存管中;

      4)先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h 后轉(zhuǎn)入液氮中進行長期保存。使用程序

      降溫盒可直接放入-80℃。

      二、細胞培養(yǎng)操作

      1) 復蘇細胞:以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

      2) 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

      a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

      b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

      c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數(shù)。

      b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。


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      公司正在出售的產(chǎn)品:

      PKC delta: 蛋白激酶C亞性D型抗體 SLPI Others Human SLPI 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

      小鼠肺大動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠(CYCS)ELISA試劑盒 Mouse Slit2  小鼠Slit2 96T

      Phospho-mu Opioid Receptor (Ser375) 0酸化μ-型受體抗體 95-D細胞,高轉(zhuǎn)移肺癌細胞 人喉癌細胞,M2e細胞 正常大鼠腎細胞;NRK

      MFI2 Others Mouse 小鼠 MFI2 / CD228 / melanoansferrin 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠細胞絨毛蛋白(CVL)ELISA試劑盒 EGF(Human Epidermal growth factor)  人表皮生長因子 96T

      Phospho-MEK1 + MEK2 (Ser222) 0酸化原活化蛋白激酶激酶1/2抗體 心臟微血管內(nèi)皮細胞cDNAHCMEC cDNA

      MSTO-211H(人肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 人單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA 試劑盒 HO-1/HSP32(Hemeo xygenase 1) 血紅素氧合酶-1/熱休克蛋白-32抗原 0.5mg

      hnRNP L: 異質(zhì)核糖核蛋白L抗體 滋養(yǎng)層細胞培養(yǎng)基TM

      CXCL13 Protein Canine 重組狗 CXCL13 / BCA-1 蛋白 (His 標簽) 人單核細胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA 試劑盒 HO-2(Heme oxygenase 2) 血紅素氧合酶-2抗原 0.5mg

      HER2 receptor(1A4) HER2受體單克隆抗體 COLEC11 Others Mouse 小鼠 CL-K1 / COLEC11 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

      人前列腺平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL 人單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA 試劑盒 phospho-HP1/heterochromatin protein 1 (pTyr24)(fruit fly) 異染色質(zhì)蛋白1(0酸化多肽) 0.5mg

      J774A.1小鼠單核巨噬細胞PAI1: 內(nèi)皮細胞纖溶酶原激活抑制蛋白1抗體 DPP4 Others Cynomolgus 食蟹猴 DPP4 / DPPIV / CD26 人細胞裂解液 (陽性對照)

      NCI-H358 人非小細胞肺癌細胞 大鼠低密度脂蛋白(LDL)ELISA試劑盒 INH-A(Human Inhibin)  人抑制素A 96T

      PAGE1: 前列腺相關P抗原家族成員1抗體 3T3 swiss細胞,swiss鼠胚胎成纖維細胞 人癌細胞,MB-271細胞 LDH細胞毒性檢測試劑盒LDH

      FCER2 Others Mouse 小鼠 FCER2A / CD23 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA 試劑盒 SHBG(Human sex hormone-binding globulin)  人性激素結(jié)合球蛋白 96T

      Phosphotyrosine 0酸化酪酸抗體 婆羅門牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-4

       

      三、培養(yǎng)注意事項 

      1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

      2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,責任由 客戶自行承擔。

      3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

      4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

      5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

      6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞 的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

      7. 該細胞僅供科研使用。

      8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。     收到細胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。

      9. 注意:  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。





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