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      MEF小鼠胚胎成纖維細胞

      更新時間:2024-11-16

      簡要描述:

      MEF小鼠胚胎成纖維細胞公司正在出售的產品:GLUT8: 葡萄糖轉運蛋白8抗體 AGER Others Human 人 AGER / RAGE 人細胞裂解液 (陽性對照)
      CL-0326Caki-2(人腎透明細胞癌細胞)5×106cells/瓶×2 人脂肪分化相關蛋白(ADRP)ELISA 試劑盒 IgG/Gold 膠體金標記的小鼠抗羊IgG 2ml
      Glycophorin C: 糖蛋白C抗體 M

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      公司產品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!



      1、細胞傳代:

      1)細胞生長至覆蓋培養瓶的 80%面積時,棄 25cm2培養瓶中的培養液,用 PBS 清洗細胞一次;

      2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入 5ml 培養

      液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;

      3)棄上清,沉淀細胞用 1-2ml 培養基重懸,然后按 1:2 比例進行分瓶傳代,最后放入 37℃,5%CO2細胞

      培養箱中培養;

      產品名稱

      規格

      貨號

      MEF小鼠胚胎成纖維細胞

      1×106

      P-X1078

      一、商品介紹:

      產品名稱

      MEF小鼠胚胎成纖維細胞

      種屬

      C57BL/6小鼠

      細胞別稱

      MEF;小鼠胚胎成纖維細胞

      年齡性別

      9

      生長特性

      貼壁生長

      組織來源

      胚胎

      細胞形態

      成纖維細胞樣

      背景簡介

      取孕9天的615小鼠胚胎,去除腦、心臟等培養建立。MEF細胞可用作飼養層細胞,支持胚胎干細胞ES的生長并維持ES未分化的狀態。當作為飼養層細胞時,MEF需經絲裂C處理停止生長。

      生物安全等級


      細胞規格

      1×106

      支原體檢測

      基因表達情況


      保藏機構


      培養基

      DMEM+10% FBS+PS

      培養條件

      氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37

      凍存條件

      無血清凍存液,液氮儲存

      倍增時間


       

      2、細胞凍存:

      1)細胞生長至覆蓋培養瓶的 80%面積時,棄 25cm2培養瓶中的培養液,用 PBS 清洗細胞一次;

      2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入培養液終

      止消化,輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;

      3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細胞,并放置于凍存管中;

      4)先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h 后轉入液氮中進行長期保存。使用程序

      降溫盒可直接放入-80℃。

      二、細胞培養操作

      1) 復蘇細胞:以下細胞培養凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產品說明書為主。將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10 cm皿中,加入約8 mL培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

      2) 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。

      a、棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

      b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,使消化液浸潤所有細胞,將培養瓶置于37℃培養箱中消化1-2 min(視細胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加2-3ml培養基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養液后吹勻。

      c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養基的新皿中或者瓶中,置于培養箱中培養。 3) 細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;a、收集細胞及細胞培養液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數。

      b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。


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      公司正在出售的產品:

      LEP Protein Human 重組人 Leptin 蛋白 大鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒 ER  大鼠雌激素受體 96T

      SLC12A3: 氯離子轉運蛋白抗體 PRDX2 Others Human Peroxiredoxin 2 / PRDX2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

      小鼠結腸平滑肌細胞培養基 100mL 大鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA 試劑盒 IGFBP-4(Human insulin-like growth factors binding protein 4)  人結合蛋白4 96T

      NSE: 神經元特異性烯醇化酶/γ 烯醇化酶抗體 RM-1細胞,前列腺癌細胞 人胚胎腸粘膜細胞,CCC-HIE-2細胞 恒河猴腎細胞;RM-2

      CD3E Others Cynomolgus 食蟹猴 CD3e / CD3 epsilon 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠酸性鐵蛋白(AIF)ELISA試劑盒 IGFBP-3(Human insulin-like growth factors binding protein 3)  人結合蛋白3 96T

      CCL17 Protein Mouse 重組小鼠 CCL17 / TARC 蛋白 人癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA 試劑盒 PAX8(Paired box gene 8) 配對盒基因8抗原 0.5mg

      phospho-IGF1R (Tyr1161) 0酸化1受體抗體 MAPK12 Others Human ERK3 / MAPK12 / P38-gamma 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

      人子宮成纖維細胞培養基 100mL 人癌基因蛋白質p190/bcr-abl ELISA 試劑盒 PAX9(Paired box gene 9) 配對盒基因9抗原 0.5mg

      IDE: 胰島素降解酶抗體 非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5B;Vero-HCV-NS5B 人卵巢癌細胞,SK-OV-3[SKOV-3]細胞 BT549(管癌細胞)

      SEMA4D Others Rat 大鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 人細胞裂解液 (陽性對照) 人癌標志物-CA153ELISA 試劑盒 P-cadherin(placental) P-鈣粘附分子抗原 0.5mg

      MEF小鼠胚胎成纖維細胞人脈絡叢成纖維細胞總RNAHCPF NA 大鼠補體成分4(C4)ELISA試劑盒 AMPK(Human Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase)  0酸化腺苷酸活化蛋白激酶 96T

      RNF41: 環指蛋白41抗體 非洲綠猴腎細胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-

      轉化細胞 人卵巢成纖維細胞培養基 100mL 大鼠補體成分3(C3)ELISA試劑盒 LDH(Human Lactate Dehydrogenase)  人乳酸脫氫酶 96T

      RAD21: 核基質蛋白21抗體 原代肝實質細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml

      RA, 大鼠星形膠質細胞 大鼠補體C5a(C5a)ELISA試劑盒 ADAM9(Human A Disintegrin And Metalloprotease 9)  人解整合素樣金屬蛋白酶9 96T


      三、培養注意事項 

      1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象 發生請及時和我們聯系。

      2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需 細胞因子等,確保細胞培養條件一致,若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題,責任由 客戶自行承擔。

      3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題,部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現象。觀察好細胞狀態后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養箱放置 2-4h。

      4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,用新鮮的培養基重懸 細胞,并接種到新的培養瓶或培養皿中,置于培養箱中進行培養。

      5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。

      6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,告知細胞 的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

      7. 該細胞僅供科研使用。

      8. 備注:運輸用的培養基 (灌液培養基) 不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培 養條件新配制的培養基來培養細胞。     收到細胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。

      9. 注意:  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。





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