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      槐角探針法PCR鑒定試劑盒說明書

      更新時間:2024-11-18

      簡要描述:

      槐角探針法PCR鑒定試劑盒說明書公司相關(guān)產(chǎn)品 Dulcitol Semisolid Agar 10
      古洛糖6027-89-0 L-Gulose 衛(wèi)矛醇半固體 20支
      普魯蘭糖9057-02-7 Pululan 1 vitamin K1 1g
      L-甘露糖10030-80-5包裝 L-Manse 12測定用培養(yǎng)基 Vitamin B12 Assay Me

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      實驗流程:
      1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
      2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
      3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
      4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
      5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
      6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
      7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
      8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None
      9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。

      產(chǎn)品名稱

      槐角探針法PCR鑒定試劑盒說明書

      英文名稱

      sophorae

      貨號

      BH-P99345

      特點(diǎn):
      1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
      2. 根據(jù)地黃保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
      3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
      4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
      5. 本試劑盒足夠 50 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR
      6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
      使用方法:
      一、樣品采集:
      1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗阪崎腸桿菌檢驗要求進(jìn)行。
      2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
      3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
      4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
      一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
      1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA段作為陽性對照。
      2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 765432
      3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
      4. 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
      5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
      6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
      7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
      注:上述樣品建議經(jīng)過增菌后,收集培養(yǎng)物用于檢測。
      二、DNA提取:
      可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以下說明進(jìn)行DNA核酸的粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品,并按照相應(yīng)試劑盒說明進(jìn)行操作。
      1、液體培養(yǎng)物:取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無菌離心管中,8000rpm離心3min,盡量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min13000rpm離心3min,取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
      2、固體培養(yǎng)物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min13000rpm離心3min,取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
      3、糞便樣品:挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中,加入0.5mL生理鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min13000rpm離心3min取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
      4、其他液體標(biāo)本:取標(biāo)本2-3mL13000rpm離心3min,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min13000rpm離心3min取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
      注:陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取),直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽性對照濃度較高,建議在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。
      人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞 (HHSEC) ( 5×105 ) 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs) Rattus碳酸氫鉀(AR)Potassium bicarbonate質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR

      小鼠肝癌細(xì)胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]十二烷基磺酸鈉(BR) dodecanesulfonate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

      SERPINB3 Others Human SerpinB3 / SCCA-1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Theophylline質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

      CM-R102大鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL纖維素酶Cellulase質(zhì)量規(guī)格:>2000U/mg

      786-O [786-0], 人腎透明腺癌細(xì)胞 小鼠T細(xì)胞,CTLL-2細(xì)胞 HT-29(人結(jié)腸癌細(xì)胞)Chondroitin sulfate質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
      hFOB 1.19(SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 產(chǎn)氣腸桿菌D-D-Tryptophan質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

      膀胱上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)D-半乳糖胺鹽酸鹽D(+)-Galactosamine 質(zhì)量規(guī)格:BR,98%

      TSPAN8 Others Human TSPAN8 / Teaspanin 8 / TM4SF3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) ;重樓皂苷III(標(biāo)準(zhǔn)品)Dioscin質(zhì)量規(guī)格:HPLC98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品

      人成骨肉瘤細(xì)胞;Saos-2薯蕷皂甙Dioscin質(zhì)量規(guī)格:BR,含量≥95.0%

      AD293細(xì)胞,人胚腎細(xì)胞 牛胚氣管細(xì)胞,EB(NBL-4)細(xì)胞 CL-0303PATU8988(人胰腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2薯蕷皂素(標(biāo)準(zhǔn)品)Diosgenin質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品
      WISH細(xì)胞,人羊膜細(xì)胞 普通變形桿菌 中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%BROxalyldihydrazide

      CXCL9 Protein Cymolgus 重組食蟹猴 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白惡唑(>96%BC)質(zhì)量規(guī)格:>96%BCOxazole

      NCI-H292(人肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/1A/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 乙酸鈀質(zhì)量規(guī)格:BCPalladium (II) acetate

      小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-D2氯化鈀質(zhì)量規(guī)格:BCPalladium (II) chloride

      ALOX15B Others Human ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鄰苯二甲腈(>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)Phthalonitrile
      槐角探針法PCR鑒定試劑盒說明書EPCAM Others Human EpCAM / OP1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Antipaindixy7chloride抗痛素100克生物技術(shù)級,600u/mg

      人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞總RNAHIBEpiC NA啊匹油脂 L cPIqZON GRqcSq L 1678-0-3

      PAK3 Others Human PAK3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Sulforhodaminep磺酰羅丹明B細(xì)胞培養(yǎng)試劑染料100毫克BS

      中國倉鼠卵巢細(xì)胞;TPO-CHO-IBOVINESERU
      儲存條件:
      14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
      1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
      2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
      3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
      4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
      5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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