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      地黃探針法PCR鑒定試劑盒說明書

      更新時(shí)間:2024-11-18

      簡(jiǎn)要描述:

      地黃探針法PCR鑒定試劑盒說明書公司相關(guān)產(chǎn)品 柯諾辛B Corynoxine B 17391-18-3 分子式:C22H28N2O4 分子量:384.47
      根皮苷 二水合物 Phloridzin dihydrate 弗羅利辛 二水合物 Phloridzin dihydrate 7061-54-3 分子式:C21H28O12 分子量:472.40
      苦玄參苷IA Piefe

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      特點(diǎn):
      1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
      2. 根據(jù)地黃保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
      3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
      4. 一管式熒光定量 PCR 檢測(cè),避免后續(xù)污染。
      5. 本試劑盒足夠 50 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR
      6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

      產(chǎn)品名稱

      地黃探針法PCR鑒定試劑盒說明書

      英文名稱

      rehmanniae

      貨號(hào)

      BH-P99717

      使用方法:
      一、樣品采集:
      1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)阪崎腸桿菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
      2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
      3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
      4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
      一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
      1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA段作為陽(yáng)性對(duì)照。
      2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 765432
      3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
      4. 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
      5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
      6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
      7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
      注:上述樣品建議經(jīng)過增菌后,收集培養(yǎng)物用于檢測(cè)。
      二、DNA提取:
      可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以下說明進(jìn)行DNA核酸的粗提。也可采購(gòu)上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品,并按照相應(yīng)試劑盒說明進(jìn)行操作。
      1、液體培養(yǎng)物:取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無菌離心管中,8000rpm離心3min,盡量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min13000rpm離心3min,取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
      2、固體培養(yǎng)物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min13000rpm離心3min,取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
      3、糞便樣品:挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中,加入0.5mL生理鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min13000rpm離心3min取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
      4、其他液體標(biāo)本:取標(biāo)本2-3mL13000rpm離心3min,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min13000rpm離心3min取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
      注:陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取),直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽(yáng)性對(duì)照濃度較高,建議在樣品制備區(qū)域加入陽(yáng)性對(duì)照。
      實(shí)驗(yàn)流程:
      1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
      2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
      3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
      4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
      5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
      6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
      7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
      8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None
      9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
      儲(chǔ)存條件:
      14或-20樣品收集、處理及保存方法
      1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
      2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
      3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
      4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
      5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
      T-24(人膀胱癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H5N1 (A/common magpie/Hong Kong/5052/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1酸三戊酯(>98.0%(GC))Triamyl Phosphate質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)

      人外根殼細(xì)胞cDNAHHORSC cDNA(2-氯乙基)1酸酯(>97.0%(GC))Tris(2-chloroethyl) Phosphate質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)

      SELP Others Rat 大鼠 SELP / selectin P / P-selectin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1酸三(1,3-二氯-2-丙基)(>95.0%(GC))Tris(1,3-dichloro-2-propyl) Phosphate質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)

      小鼠腹水瘤細(xì)胞;S-1801酸三(2-正丁氧乙基)(>95.0%(GC))Tris(2-butoxyethyl) Phosphate質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)

      小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B4 I型膠原酶(10mL酶解緩沖液) 1mL12-乙基己基二苯酯(>90.0%(GC))2-Ethylhexyl Diphenyl Phosphate質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(GC)
      小小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞(MA-c)(5×105) MG-63, 人骨肉瘤細(xì)胞 Human泊洛沙姆407質(zhì)量規(guī)格:M.W12000,進(jìn)口BASF分包Polyethylene-polypropylene glycol

      大鼠肺泡上皮細(xì)胞RPAEpiC1酸長(zhǎng)春質(zhì)堿質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRCatharanthine hemitartrate

      ENPP2 Others Mouse 小鼠 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定Meclofexate HCl

      HEL2 人胚胎肺成纖維細(xì)胞()質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,USP31Megestrol Acetate

      CM-R067大鼠腎足突細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Megestrol Acetate
      HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/R0405050/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP31Nizatidine

      CL-0444SNU-5(人胃癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2羧甲基纖維素質(zhì)量規(guī)格:粘度(1%,25) 500 mpa.sCarboxymethyl cellulose

      LCK Others Human Lck Kinase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 氟達(dá)拉賓質(zhì)量規(guī)格:≥99.0%,BRFludarabine

      人支氣管平滑肌細(xì)胞RNAHBSMC miRNA5 μg(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Amiglutethimide

      WISH細(xì)胞,羊膜細(xì)胞 人肺癌細(xì)胞,A-427細(xì)胞 rCSC, 大鼠心肌細(xì)胞質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP29Flutamide
      地黃探針法PCR鑒定試劑盒說明書人胰腺癌細(xì)胞;AsPC-15-DMT-2-TBDMS-iBu-rG質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR5-DMT-2-TBDMS-iBu-rG

      CD48 Others Rat 大鼠 CD48 / SLAMF2 / BCM1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 5-DMT-2-TBDMS-Ac-rC質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR5-DMT-2-TBDMS-Ac-rC

      兔骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 Rabbit bone marrow mesenchymal stem cells5-DMT-2-TBDMS-Bz-rA質(zhì)量規(guī)格:

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