更新時間:2024-11-22
DH5α 感受態細胞100ul*100菌株一種常用于質粒克隆的菌株。其φ80lacZΔM15基因的產物可與pUC載體編碼的b-半乳糖苷酶氨基端實現a互補,可用于藍白斑篩選。recA1和endA1 的突變有利于克隆DNA 的穩定和高純度質粒DNA的提取。
以下是DH5α 感受態細胞100ul*100的訂購信息儲存條件:-70℃凍存
操作方法:
1. 取-80℃保存的農桿菌感受態于室溫或手心片刻待其部分融化,處于冰水混合狀態時插入冰中。
2.每100 μl感受態加入0.01-1 μg質粒DNA(轉化效率較高,*次使用前做預實驗確定所加質粒的量),用手管底混勻,依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
3. 加入700 μl無抗生素的LB或YEB液體培養基,于28℃振蕩培養2~3小時。
4. 6000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培養箱培養2-3天
DH5α 感受態細胞100ul*100注意事項
1. 加入質粒時體積不應大于感受態體積的1/10;質粒不純或存在乙醇等有機物污染,轉化效率急劇下降;質粒增大一倍,轉化效率下降一個數量級。
2. 混入質粒時應輕柔操作。轉化高濃度的質粒可相應減少終用于涂板的菌量。
3. 平板上陽性克隆密度過大時,由于營養不足,陽性克隆生長變慢,菌落變小,為了獲得大的菌落,應減少質粒用量。
4. 濃度不應高于25 μg/ml,過高的濃度不利于農桿菌生長,會降低其生長速度和轉化效率。本公司感受態計算轉化效率時所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif則轉化效率降低到1/2。
5. 培養基中加入的目的是防止雜菌生長、篩選農桿菌;根據所用菌株抗性加入Ti質粒篩選抗生素可防止Ti質粒丟失,但Ti質粒篩選抗生素不利于農桿菌的轉基因操作,所以一般培養農桿菌時不考慮這些抗生素,Ti質粒丟失的概率極低(可以忽略)。
載脂蛋白C3抗體 CTSH ELISA Kit 組織蛋白酶H(CTSH)ELISA試劑盒
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磷酸化自噬相關蛋白4C抗體 cath-D ELISA Kit 組織蛋白酶D(cath-D)ELISA試劑盒
磷酸化自噬相關蛋白4C抗體 CTSC ELISA Kit 組織蛋白酶C(CTSC)ELISA試劑盒
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磷酸化失調癥蛋白1抗體 HDAC2 ELISA Kit 組蛋白脫乙酰化酶2(HDAC2)ELISA試劑盒
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磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體 HDAC ELISA Kit 組蛋白去乙酰化酶(HDAC)ELISA試劑盒
磷酸化細胞凋亡信號調節激酶1抗體 SETD7 ELISA Kit 組蛋白賴氨酸N-甲基轉移酶SETD7(SETD7)ELISA試劑盒
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磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體 HIS ELISA Kit 組胺(HIS)ELISA試劑盒
磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體 PCX ELISA Kit 足細胞標記蛋白/足盂蛋白(PCX)ELISA試劑盒
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磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體 NRAMP-2 ELISA Kit 自然抗性相關巨噬細胞蛋白2(NRAMP-2)ELISA試劑盒
磷酸化毛細血管擴張性共濟失調癥突變蛋白抗體 NRAMP-1 ELISA Kit 自然抗性相關巨噬細胞蛋白1(NRAMP-1)ELISA試劑盒
磷酸化三磷酸腺檸檬酸裂解酶抗體 Pax ELISA Kit 樁蛋白(Pax)ELISA試劑盒
磷酸化ATR抗體 TF ELISA Kit 轉移因子(TF)ELISA試劑盒
細胞核重定位及紡錘體檢查點蛋白AMN1抗體 TFR/CD71 ELISA Kit 轉鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒
天連接糖基化11抗體 TRIM28/KAP1/RNF96/TIF1B ELISA Kit 轉錄中介因子1-β(TRIM28/KAP1/RNF96/TIF1B)ELISA試劑盒
ACTR2 激活素受體2A抗體
Activin Receptor Type IIB 激活素受體2B抗體
C2orf88 2號染色體開放閱讀框88抗體
ARHGEF18 G蛋白偶聯受體ARHGEF18抗體
Activin A Receptor Type IB 激活素受體1B抗體
ARA24 雄激素受體相關蛋白24抗體
Amyloid Precursor Protein 淀粉樣肽前體蛋白抗體
ADCY2 腺苷酸環化酶2抗體
APOC3 載脂蛋白C3抗體
Apolipoprotein E4 載脂蛋白E4抗體
AMBRA1 自噬相關基因AMBRA1抗體
Phospho-ATG4C 磷酸化自噬相關蛋白4C抗體
Phospho-ATG4C 磷酸化自噬相關蛋白4C抗體
phospho-ASK1 磷酸化細胞凋亡信號調節激酶1抗體
phospho-ATXN1 磷酸化失調癥蛋白1抗體
DH5α 感受態細胞100ul*100phospho-Amyloid Precursor Protein 磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體
phospho-ASK1 磷酸化細胞凋亡信號調節激酶1抗體
phospho-ASK1 磷酸化細胞凋亡信號調節激酶1抗體
phospho-ATF2 磷酸化活化復制因子2抗體
Phospho-ATP1A1 磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體
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