R5421 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10?

R5421 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10? 操作方法（以下操作均按無菌條件的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行）
1 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中，如需分裝可將剛?cè)诨?xì)胞懸液分裝到無菌預(yù)冷的離心管中，置于冰浴中。
●  一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100 μl，可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。應(yīng)注意所用DNA 體積不要超過感受態(tài)細(xì)胞懸液體積的十分之一。
以下實(shí)驗(yàn)以100 μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
R5421 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10? 2 向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（100 μl 的感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng 超螺旋質(zhì)粒DNA 所飽和），輕輕旋轉(zhuǎn)離心管以混勻內(nèi)容物，在冰浴中靜置30 分鐘。
3 將離心管置于42℃水浴中放置60-90 秒，然后快速將管轉(zhuǎn)移到冰浴中，使細(xì)胞冷卻2-3 分鐘，該過程不要搖動(dòng)離心管。
4 向每個(gè)離心管中加入900 μl 無菌的SOC 或LB 培養(yǎng)基（不含抗生素）， 混勻后置于37℃搖床振蕩培養(yǎng)1 小時(shí)（160-220 轉(zhuǎn)/分鐘），目的是使質(zhì)粒上相關(guān)的抗性標(biāo)記基因表達(dá)，使菌體復(fù)蘇。
R5421 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10? 5 將離心管內(nèi)容物混勻，吸取100 μl 已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞加到含相應(yīng)抗生素的SOB 或LB 固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的彎頭玻棒輕輕的將細(xì)胞均勻涂開。將平板置于室溫直至液體被吸收，倒置平板，37℃培養(yǎng)12-16 小時(shí)。
●  涂布用量可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)來調(diào)整。如轉(zhuǎn)化的DNA 總量較多，可取更少量轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板；反之，如轉(zhuǎn)化的DNA 總量較少，可取200-300 μl 轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板。如果預(yù)計(jì)的克隆較少，可通過離心（4,000 rpm, 2分鐘）后吸除部分培養(yǎng)液，懸浮菌體后將其涂布于一個(gè)平板中。（涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的轉(zhuǎn)化菌落數(shù)過少可以將剩下的菌液再涂布新的培養(yǎng)板）
 注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)保存在 -70℃，不可多次凍融和放置時(shí)間過長，以避免降低感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。
2. 進(jìn)行轉(zhuǎn)化操作時(shí)，應(yīng)根據(jù)相應(yīng)溫度及無菌條件的要求進(jìn)行。
3 為防止轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)不成功，可以保留部分連接反應(yīng)液，以重新轉(zhuǎn)化，將損失降到低。
以下是的相關(guān)產(chǎn)品：

 SDH 人脫氫酶 規(guī)格： 48T/96T

 CT 人沙眼衣原體抗體 規(guī)格： 48T/96T

 CT 人沙眼衣原體抗體 規(guī)格： 48T/96T

 KLR 人殺傷細(xì)胞凝集素樣受體 規(guī)格： 48T/96T

 KIR 人殺傷細(xì)胞免疫球蛋白樣受體 規(guī)格： 48T/96T

 BPI 人殺菌性/通透性增加蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 cecropin 人殺菌肽 規(guī)格： 48T/96T

 PEDF 人色素上皮衍生因子 規(guī)格： 48T/96T

 T3 人*狀腺原氨酸 規(guī)格： 48T/96T

 HC gp-39 人軟骨糖蛋白39 規(guī)格： 48T/96T

 COMP 人軟骨寡聚基質(zhì)蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 BRCA-2 人乳腺癌易感蛋白2 規(guī)格： 48T/96T

 BRCA-1 人乳腺癌易感蛋白1 規(guī)格： 48T/96T

人乳腺癌標(biāo)志物-CA153ELISA Kit，48T/96T 人乳腺癌標(biāo)志物-CA153ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T

 HPV-IgM 人狀瘤病毒抗體IgM 規(guī)格： 48T/96T

 HPV-IgG 人狀瘤病毒抗體IgG 規(guī)格： 48T/96T

 HPV 人狀瘤病毒抗體 規(guī)格： 48T/96T

 LF/LTF Ab-Ig 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG 規(guī)格： 48T/96T

 LF/LTF 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 LDH 人乳酸脫氫酶 規(guī)格： 48T/96T

 Hc 人溶血補(bǔ)體 規(guī)格： 48T/96T

 HLAMP-2 人溶酶體相關(guān)膜蛋白2 規(guī)格： 48T/96T

 LZM 人 規(guī)格： 48T/96T

 β-HCG β 規(guī)格： 48T/96T

 HCG 規(guī)格： 48T/96T

 PAPP-A 人相關(guān)血漿蛋白A 規(guī)格： 48T/96T

 SP1/PSβ1-G 人特異性β1糖蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 HG 人皰疹抗體 規(guī)格： 48T/96T

 HSF-1 人熱休克因子1 規(guī)格： 48T/96T

 HSP gp96 人熱休克蛋白糖蛋白96 規(guī)格： 48T/96T

 HSP-90 人熱休克蛋白90 規(guī)格： 48T/96T

 HSP-70 人熱休克蛋白70 規(guī)格： 48T/96T

 Hsp-60 人熱休克蛋白60 規(guī)格： 48T/96T

R5421 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10?  HSP-40 人熱休克蛋白40 規(guī)格： 48T/96T

 HSP-27 人熱休克蛋白27 規(guī)格： 48T/96T

 HSP-20 人熱休克蛋白20 規(guī)格： 48T/96T