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      HARA-B細(xì)胞

      更新時(shí)間:2024-11-23

      簡(jiǎn)要描述:

      HARA-B細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:血栓溶解活力(THROMBOLYTIC)體外檢測(cè)試劑盒
      細(xì)胞組織型纖維蛋白溶酶原激活劑(tPA)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
      組織樣品組織型纖維蛋白溶酶原激活劑(tPA)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
      血液組織纖維型蛋白溶酶原激活劑(tPA)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

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      公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!

      一、商品介紹:

      產(chǎn)品名稱

      規(guī)格

      貨號(hào)

      HARA-B細(xì)胞

      1×106

      P-X9081

       

      1、細(xì)胞傳代:

      1)細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時(shí),棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細(xì)胞一次;

      2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入 5ml 培養(yǎng)

      液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;

      3)棄上清,沉淀細(xì)胞用 1-2ml 培養(yǎng)基重懸,然后按 1:2 比例進(jìn)行分瓶傳代,最后放入 37℃,5%CO2細(xì)胞

      培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

      2、細(xì)胞凍存:

      1)細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時(shí),棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細(xì)胞一次;

      2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終

      止消化,輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;

      3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;

      4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過(guò)夜,24h 后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長(zhǎng)期保存。使用程序

      降溫盒可直接放入-80℃。


      二、細(xì)胞培養(yǎng)操作

      1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書為主。將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

      2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

      a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

      b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細(xì)胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

      c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無(wú)菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

      b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。


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      公司正在出售的產(chǎn)品:

      細(xì)胞半-12CASPASE-12)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

      6%蛋白電泳分離預(yù)制膠溶液

      線蟲(chóng)基因組DNA分離試劑盒

      細(xì)胞HISTONE H3蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒

      植物源性食品榛果(hazelnut)基因檢測(cè)試劑盒

      10倍磷酸平衡鹽(PBS)緩沖溶液

      組織糖原磷酸化酶(GLYCOGEN PHOSPHORYLASE)活性

      超氧化物歧化酶(SOD)活性檢測(cè)試劑盒(附標(biāo)準(zhǔn)樣)

      冰凍切片神經(jīng)膠質(zhì)染色試劑盒

      5-HIAA高效液相色譜電化學(xué)定量檢測(cè)試劑盒

      ?石蠟切片組織COLLAGEN III蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒

      豆制品US-Methylmethionine)比色法定量檢測(cè)試劑盒

      RUNX3蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒

      細(xì)胞基質(zhì)金屬(MMP-9)明膠法比色定量檢測(cè)試劑盒

      動(dòng)物細(xì)胞/組織線粒體粗提分離試劑盒

      粘脂蛋白1抗體

      肝癌相關(guān)抗原57抗體

      缺氧誘導(dǎo)基因1B蛋白抗體

      Ki67蛋白重組兔單克隆抗體

      細(xì)胞角蛋白4抗體

      α-L-艾杜糖苷酶抗體

      辣椒素受體5抗體

      HARA-B細(xì)胞ATP依賴RNA解旋酶DDX28抗體

      鋅指蛋白ZBTB3抗體

      三、培養(yǎng)注意事項(xiàng) 

      1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

      2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

      3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

      4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

      5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

      6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。

      7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

      8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。

      9. 注意:  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。


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