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      LU99A細胞

      更新時間:2024-11-23

      簡要描述:

      LU99A細胞公司正在出售的產品:細胞INSULIN R-ALPHA 蛋白表達熒光定量檢測試劑盒
      INSULIN R-ALPHA 蛋白表達西方雜交分析試劑盒
      INSULIN R-ALPHA 蛋白免疫共沉淀分析試劑盒
      INSULIN R-ALPHA 蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒
      細胞FSH-BETA蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒

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      公司產品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!

      一、商品介紹:

      產品名稱

      規(guī)格

      貨號

      LU99A細胞

      1×106

      P-X9238

       

      1、細胞傳代:

      1)細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時,棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細胞一次;

      2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入 5ml 培養(yǎng)

      液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;

      3)棄上清,沉淀細胞用 1-2ml 培養(yǎng)基重懸,然后按 1:2 比例進行分瓶傳代,最后放入 37℃,5%CO2細胞

      培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

      2、細胞凍存:

      1)細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時,棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細胞一次;

      2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終

      止消化,輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;

      3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細胞,并放置于凍存管中;

      4)先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h 后轉入液氮中進行長期保存。使用程序

      降溫盒可直接放入-80℃。

      二、細胞培養(yǎng)操作

      1) 復蘇細胞:以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產品說明書為主。將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

      2) 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

      a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

      b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

      c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數(shù)。

      b、根據細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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      公司正在出售的產品:

      通用型蘋果酸脫氫酶(MDH)活性比色法定量檢測試劑盒

      超白金TAG DNA聚合酶

      重組逆轉錄病毒穩(wěn)態(tài)表達細胞篩選試劑盒

      細胞ERK蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒

      體液牛病毒性腹瀉病毒II型(Bovine Viral Diarrhoea Virus -2;BVDV-2)定量PCR擴增檢測試劑盒

      細胞培養(yǎng)液高密度脂蛋白(HDL-Cholesterol)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒

      組織組蛋白乙酰轉移酶(HAT)總活性比色法定量檢測試劑盒

      純化線粒體蛋白氧化(羰基化;carbonyl)熒光檢測試劑盒

      前列腺固著液(Hollande固著液)

      細菌異化型鹽還原酶活性比色法定量檢測試劑盒

      PARP蛋白表達西方雜交分析試劑盒

      飲料D-乳酸比色法定量檢測試劑盒

      人體P14基因甲基化檢測試劑盒

      組織CHK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

      動物多核白細胞分離試劑盒

      脂肪堆積和肥胖相關蛋白抗體

      高密度脂蛋白結合蛋白1抗體

      人類乳頭狀瘤病毒16-E7抗體

      LMO7蛋白抗體

      細胞生長調控蛋白19/環(huán)指蛋白197抗體

      γ-谷氨酰轉移酶輕鏈1抗體

      鏈球菌溶血素O抗體

      LU99A細胞Brachyury蛋白抗體

      嗅覺受體51B6抗體

      三、培養(yǎng)注意事項 

      1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

      2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,責任由 客戶自行承擔。

      3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

      4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

      5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

      6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞 的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

      7. 該細胞僅供科研使用。

      8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。     收到細胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。

      9. 注意:  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。


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