PNOS基因核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）

訂購信息：
 產品名稱：PNOS基因核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
規格：48T  0.2PCR管
編號：BH-P97068
分類：PCR-熒光探針法
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
產品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

準備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產品說明書                                   1份
使用及效果：
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。
CM-H010小氣道上皮細胞*培養基100mL()Procaine HPLC>99%,

WM35, 色素瘤細胞伏立諾他雜質Vorinostat impurity>98%

肝癌細胞;Hep G2 [HepG2] 大鼠肺成纖維細胞*培養基 100mL當藥醇苷()SwertianolinHPLC≥98%,

原代神經元細胞培養特制添加劑Many types of cells　5/2.5/1ml皂素(進分)saponin進分，≥10 %

MET Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 細胞裂解液 (陽性對照) 苦豆堿AloperineHPLC>95%,BR
支氣管平滑肌細胞cDNAHBSMC cDNABOC-L-天冬酰胺≥98.5%,BRBoc-Asn-OH

小型豬腎細胞;MPK 畸胎癌細胞，P19細胞 W256細胞，Walker氏癌肉瘤256瘤株Boc-L->98.5%,BRBoc-Gln-OH

Sars結構蛋白表達株;293 001ABoc-L- N-丁二酯BRBoc-Ala-OSu

HA Others H5N3 甲型流感 H5N3 (A/duck/Hokkaido/167/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細胞裂解液 (陽性對照) BOC-D->98.5%,BRBoc-D-Ala-OH

CL-0240V79(倉鼠肺細胞)5×106cells/瓶×2BOC-L-天冬氨酸>98.5%,BRBoc-Asp-OH
PNOS基因核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）SW1990細胞，胰腺癌細胞 胸膜瘤細胞,SMC-1細胞 雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7E74-乙酰氧基它莫西芬美國進口4-Acetoxy Tamoxifen

HUVEC(HUV-EC-C) (臍靜脈血管內皮細胞) 5×106cells/瓶×2N-去甲基-4-羥基它莫西芬-d5 (1:1 E/Z 混合物)美國進口N-Desmethyl-4-hydroxy Tamoxifen-d5 (1:1 E/Z Mixture)

Promocell C-22022 Endothelial Cell GrowthMedium MV2, 內皮細胞生長培養基MV2(即用型) 500ml(Z)-4-羥基-N-去甲基它莫西芬 (同分)美國進口(Z)-4-Hydroxy-N-desmethyl Tamoxifen (mixture of isomers)

生發基質細胞裂解物HHGMCLN-去甲基-4-羥基它莫西芬 (大約1:1 E/Z 混合物)美國進口N-Desmethyl-4-hydroxy Tamoxifen (approx. 1:1 E/Z Mixture)

IL17RB Others Human  IL17RB / IL-17 Receptor B 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (1R,4R)-N-去甲基美國進口(1R,4R)-N-Desmethyl Sertraline
檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應體系配制如下表：
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。