薄荷染料法PCR鑒定試劑盒說明書

實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

產(chǎn)品及特點(diǎn)：
本產(chǎn)品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液，濃度為2×。具有快速簡(jiǎn)便、靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)，可大限度的減少人為誤差。使用時(shí)只需加入DNA模板和引物既可。使用方便快捷，能避免PCR操作過程中的污染，使用時(shí)只需取適量2×TaqPCR MasterMix溶液，加入模板和引物，并加入去離子水補(bǔ)足體積，使MasterMix溶液濃度為1×即可進(jìn)行反應(yīng)。使用前請(qǐng)保證充分溶解并混勻，操作需在冰上進(jìn)行。本產(chǎn)品就是為此目的根據(jù) PCR 原理開發(fā)的試劑盒。
具有高靈敏度、高特異性、高穩(wěn)定性
可在同一個(gè)管子中高特異性的執(zhí)行cDNA合成與基于探針的qPCR反應(yīng)。更多優(yōu)點(diǎn)如1.的特異性；2.多重反應(yīng)（高通量）；3.反應(yīng)體系配置，無需冰塊；4.無懼高GC含量PCR；5.預(yù)防交叉污染；6.廣泛的設(shè)備兼容性。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
Y2細(xì)胞，小鼠成纖維細(xì)胞 人卵巢癌耐藥株,COC1/CDDP細(xì)胞 人食道上皮細(xì)胞裂解物HEEpiCL十五氟辛酸(約5mmol)[離子對(duì)色譜級(jí)]IPC-PFFA-8 (ca. 5mmol)質(zhì)量規(guī)格：用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對(duì)試劑

非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1十五氟辛酸,高等級(jí)[離子對(duì)色譜級(jí)]IPC-PFFA-8 HG質(zhì)量規(guī)格：用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對(duì)試劑

IGFBP3 Others Human 人 IGFBP3 / IBP3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 9,10-二甲氧基蒽-2-磺酸鈉鹽[離子對(duì)色譜級(jí)]IPA-DAS質(zhì)量規(guī)格：用于氨類的熒光離子對(duì)試劑

兔角膜前基質(zhì)層成纖維細(xì)胞;RCFBF敵草隆(標(biāo)準(zhǔn)品)Diuron質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%

MAPK1 Others Mouse 小鼠 ERK2 / MAPK1 / MAPK2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 茜素紅Alizarin red質(zhì)量規(guī)格：AR
NK-92細(xì)胞，人惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細(xì)胞 人肝癌細(xì)胞系,Hep-3B細(xì)胞 CL-0184PANC-1(人胰腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2二硫代乙酰胺(>98%,BR)Dithiooxamide質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

中國(guó)倉鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-24脫氧核糖核酸酶 IIDNase II, from Pocine Pancreas質(zhì)量規(guī)格：分子生物學(xué)級(jí)

SLAMF1 Others Human 人 CD150 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 5-硝基吲哚(>98.0%(GC))5-Nitroindole質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

結(jié)腸平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)鋁酞菁(>98.0%(T))Phthalocyanine Chloroaluminum質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)

HEPACAM2 Others Rat 大鼠 HepaCAM2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 酞菁鐵(II)(升華提)(>98.0%(T))Iron(II) Phthalocyanine (purified by sublimation)質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)
RK3 Others Mouse 小鼠 RK3 / kC 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 質(zhì)量規(guī)格：≥99%,BRSulfamethazine

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;NIH/3T3 （標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品Sulfamethazine

CXCL16 Others Canine 狗 CXCL16 / SR-PSOX 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 糖精（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：校準(zhǔn)溫度計(jì)用Saccharin

Caco-2，人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：熔點(diǎn)測(cè)定Phelphthalein

NEI-H209細(xì)胞，小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 人前列腺癌細(xì)胞,22RV1細(xì)胞 人脈絡(luò)叢成纖維細(xì)胞RNAHCPF miRNA5 μg磺胺（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：檢查Sulfanilamide
薄荷染料法PCR鑒定試劑盒說明書SLAMF6 Others Human 人 SLAMF6 / Ly108 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) L-鹽酸半胱酸，英文名或英文縮寫：L-Cysteine metxyl ester xy7chloride，級(jí)別：BR，99%，規(guī)格：25克

CM-R082大鼠骨細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL加醋芐酯;蟻醋芐酯 Bqnzyl forMctq;ForMic ccid bqnzyl qstqr; 104-27-4

BSG823細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞 人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞,SK-N-SH細(xì)胞 瘤牛皮膚細(xì)胞;BIN-S1葡聚糖凝膠