紫蘇葉探針法PCR鑒定試劑盒說明書

特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)地黃保守序列設計的專一性引物，與相關(guān)病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測，避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學檢驗阪崎腸桿菌檢驗要求進行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
注：上述樣品建議經(jīng)過增菌后，收集培養(yǎng)物用于檢測。 
二、DNA提取：
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液，按以下說明進行DNA核酸的粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品，并按照相應試劑盒說明進行操作。
1、液體培養(yǎng)物：取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無菌離心管中，8000rpm離心3min，盡量吸棄上清，加入50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取上清5μL進行PCR反應。
2、固體培養(yǎng)物：挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取上清5μL進行PCR反應。
3、糞便樣品：挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中，加入0.5mL生理鹽水，振蕩混勻，13000rpm離心3分鐘，棄上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應。
4、其他液體標本：取標本2-3mL，13000rpm離心3min，棄上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應。
注：陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取)，直接取5μL加入到反應體系中即可。由于陽性對照濃度較高，建議在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。 
實驗流程：
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇ne。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
儲存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
肉豆蔻醚(標準品)  Myristicin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%，標準品 人抗型肝炎病毒抗體(ai-HCV)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

卡枯醇  Kakuol  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 小鼠前動力蛋白受體1(PKR1)ELISA試劑盒 ，英文名： PKR1 ELISA Kit

L-細辛脂素(標準品)  L-Asarinin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 人維生素E(VE)ELISA檢測試劑盒HumanVitaminE,VEEELISAKit 96T/48T

吉托皂苷元(標準品)  Gitogenin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 大鼠整合素樣金屬蛋白酶17(ADAM17)試劑盒 Rat ADAM metallopeptidase domain 17,ADAM17 ELISA kit

異甘草素  Isoliquiritigenin  質(zhì)量規(guī)格：≥98%,甘草提取 英文名稱HumanCollageypeIELISAKit人I型膠原(CollageypeI)規(guī)格：96T/48T

異甘草素（標準品）  Isoliquiritigenin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 動物組織同還原酶(aldo-ketoreductase)總活性比色法定量檢測試劑盒20

人參皂苷Re(標準品)  Ginseside Re  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 小鼠ELISA試劑盒

人參皂苷F4,人參皂苷Rg4  Ginseside F4  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 小鼠前動力蛋白2(PK2)ELISA試劑盒 ，英文名： PK2 ELISA Kit

人參皂苷RK3(標準品)  Ginseside RK3  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品 人維生素D2(VD2)ELISA檢測試劑盒HumanVitaminD2,VD2ELISAKit 96T/48T

人參皂苷RH4  Ginseside RH4  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 大鼠整合素αM型((ITG αM/CD11b)試劑盒 Rat Iegrin αM,ITG/CD11b ELISA Kit
Bisdemethoxycucurmin  中文名：雙去甲氧基姜黃素  分子式：C19H16O4  度：98.0%  小鼠白介素-2(mouse IL-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

Bis(phenylacetyl) disulfide  中文名：雙(苯乙酰)二硫化物  分子式：C16H14O2S2  度：98.0%  小鼠可溶性白介素-2受體(mouse sIL-2R)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

N,N'-Bis(2-hydroxyethyl)oxamide  中文名：N,N'-雙(2-羥乙基)草酰胺  分子式：C6H12N2O4  度：98.0%  小鼠白介素-3(mouse IL-3)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

9,9-Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl]fluorene  中文名：9,9-雙[4-(2-羥乙氧基)苯基]芴  分子式：C29H26O4  度：98.0%  小鼠白介素-4(mouse IL-4)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  

1,2-Bis(phenylthio)ethane  中文名：1,2-雙(苯硫基)乙烷  分子式：C14H14S2  度：98.0%  小鼠白介素-2   英文名稱：    ierleukin-2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IL-2
硫鋅酸  Alphalipoic acid  質(zhì)量規(guī)格：>98% 冰凍切片組織P35蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

*（標準品）  Alphalipoic acid  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 冰凍切片組織P38蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

鹽酸氨索  Ambroxol HCl  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 冰凍切片組織PAR-1蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

鹽酸氨索(標準品)  Ambroxol HCl  質(zhì)量規(guī)格：含量測定 冰凍切片組織PAR-2蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

*（三水）  Amifostine  質(zhì)量規(guī)格：干品Purity≥98.0% 冰凍切片組織PAR-3蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

*  Bacitracin  質(zhì)量規(guī)格：>65IU/MG,BR 冰凍切片組織PARP蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

鹽酸*  Amitriptyline HCl   質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP31 冰凍切片組織PDGF-A蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

苯磺酸*（絡活喜、安洛地）  Amlodipine Besylate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,EP 6.4,BR 冰凍切片組織PDGF-B蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

苯磺酸*（標準品）  Amlodipine Besylate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品 冰凍切片組織PI-3KINASEP110BETA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

*/鹽酸阿莫洛芬   Amorolfine   質(zhì)量規(guī)格：≥99,BR 冰凍切片組織PP2A蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20
紫蘇葉探針法PCR鑒定試劑盒說明書PCB . 193,10ng/ul 標準品 PCB.204  10ng/ul,10ML 特征形態(tài) 液態(tài)

PCB . 192,10ng/ul 標準品 PCB.203  10ng/ul,10ML 特征形態(tài) 液態(tài)

PCB . 190,10ng/ul 標準品 PCB.202  10ng/ul,10ML 特征形態(tài) 液態(tài)