膽南星PCR鑒定試劑盒說(shuō)明書(shū)

實(shí)驗(yàn)流程：
1. 整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。

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特點(diǎn)：
1. 即開(kāi)即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)地黃保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物，與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測(cè)，避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)阪崎腸桿菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無(wú)菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
注：上述樣品建議經(jīng)過(guò)增菌后，收集培養(yǎng)物用于檢測(cè)。 
二、DNA提取：
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液，按以下說(shuō)明進(jìn)行DNA核酸的粗提。也可采購(gòu)上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過(guò)柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品，并按照相應(yīng)試劑盒說(shuō)明進(jìn)行操作。
1、液體培養(yǎng)物：取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無(wú)菌離心管中，8000rpm離心3min，盡量吸棄上清，加入50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
2、固體培養(yǎng)物：挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
3、糞便樣品：挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中，加入0.5mL生理鹽水，振蕩混勻，13000rpm離心3分鐘，棄上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
4、其他液體標(biāo)本：取標(biāo)本2-3mL，13000rpm離心3min，棄上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
注：陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照為已經(jīng)抽提好的核酸(無(wú)需提取)，直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽(yáng)性對(duì)照濃度較高，建議在樣品制備區(qū)域加入陽(yáng)性對(duì)照。 
（標(biāo)準(zhǔn)品）  Budesonide  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 5-ROX蛋白標(biāo)記試劑盒3(200微克/)

亞鈣  Calcium Folinate  質(zhì)量規(guī)格：>98%，水合物,BR Mousefractalkine/CX3CL1ELISA試劑盒小鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

亞鈣（標(biāo)準(zhǔn)品）  Calcium Folinate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,含量測(cè)定 小鼠脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒 ，英文名： DHEA-S7 ELISA Kit

  Camptothecin  質(zhì)量規(guī)格：> 99%,喜樹(shù)提取 小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseIerferonγ,IFN-γELISAKit 96T/48T

（標(biāo)準(zhǔn)品）  Camptothecin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品 人胱天蛋白酶9(Casp-9)試劑盒 Human Caspase-9,Casp-9 ELISA Kit

卡那替尼  Canertinib 2HCl  質(zhì)量規(guī)格：含量> 99%，BR，可用于細(xì)胞培養(yǎng) RatErythropoietin,EPOELISAKit大鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

  Capecitabine  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 5-TAMRA蛋白標(biāo)記試劑盒3(200微克/)

（標(biāo)準(zhǔn)品）  Capecitabine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Mousefreefattyacids,FFAELISA試劑盒小鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

硫酸卷曲霉素  Capreomycin Sulfate  質(zhì)量規(guī)格：含量≥700IU/mg,BR 小鼠脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA 試劑盒

硫酸卷曲霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Capreomycin Sulfate  質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定 Rat peroxisome proliferator activated receptor alpha (PPAR- alpha) ELISA Kit 大鼠過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒
Endo-freePlasmidMiniKit   100T                 Androstenedione  中文名：雄烯二酮  分子式：C19H26O2 

Endo-freePlasmidMaxiKit   10T  Androstenone hydrazone  63015-10-1  中文名：雄酮腙  分子式：C19H30N2O 

EGTA   50g  Prednisone 21-acetate  中文名：  分子式：C23H28O6 

D-二聚體（D-Dimer）測(cè)定試劑盒（膠乳增強(qiáng)比濁法）  4-Acetamidophenol  中文名：  分子式：C8H9NO2  度：98.0%

D二聚體   英文名稱：   Human D. Dimer   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   D.D  Qingyangshengenin  84745-94-8  中文名：青陽(yáng)參苷元  分子式：C28H36O8
人參皂苷Rh HPLC≥98% 20mg HSV2(HERPESSIMPLX2)病毒標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒2

(S型)人參皂苷Rh HPLC≥98% 20mg HSV病毒DNA化試劑盒20

人參皂苷Rh HPLC≥98% 20mg Humaargetedribonuclease,ELISAKit人靶向核糖核酸酶()ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

人參皂苷Rh HPLC≥98% 20mg Huma-cellacelymphoblasticleukemiaaigen,TALLA-1ELISAKit人T細(xì)胞急性母細(xì)胞白血病相關(guān)抗原(TALLA-1/CD231)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

人參皂苷Rk HPLC≥95% 20mg Humaeceptorforadvancedglycationendproducts,RAGE/AGERELISAKit 人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE/AGER)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

人參皂苷Rk HPLC≥95% 20mg Humaecombinationactivatinggene1,RAG-1ELISAKit 人重組激活基因1(RAG-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

人參皂苷Rk HPLC≥98% 20mg Humaelomerase，TEELISAKit人端粒酶(TE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

人參皂苷Ro HPLC≥98% 20mg Humaenascin-R,TN-RELISAKit 人肌腱蛋白R(TN-R)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

忍冬苷 HPLC≥98% 10mg HumaerminalcomplemecomplexC5b-9,TCCC5b-9ELISAKit人末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCCC5b-9)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

日蟾蜍他靈 HPLC≥98% 10mg Humaerminaldeoxynucleotidylansferase,TdTELISAKit 人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
膽南星PCR鑒定試劑盒說(shuō)明書(shū)Etoxazole,10ng/ul 標(biāo)準(zhǔn)品 Fosthiazate  10ng/ul于環(huán)己烷,10ml 特征形態(tài) 液態(tài)

Etofenprox,10ng/ul 標(biāo)準(zhǔn)品 beta-Endosulfan  10ng/ul于乙腈,10ml 特征形態(tài) 液態(tài)

4-Ethylphenol,10ng/ul 標(biāo)準(zhǔn)品 Endosulfan(alpha+beta),10ng/ul  10ng/ul于乙腈,10ML 特征形態(tài) 液態(tài)
儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。