地龍PCR鑒定試劑盒說明書

實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

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產品及特點：
本產品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液，濃度為2×。具有快速簡便、靈敏度高、特異性強、穩定性好等優點，可大限度的減少人為誤差。使用時只需加入DNA模板和引物既可。使用方便快捷，能避免PCR操作過程中的污染，使用時只需取適量2×TaqPCR MasterMix溶液，加入模板和引物，并加入去離子水補足體積，使MasterMix溶液濃度為1×即可進行反應。使用前請保證充分溶解并混勻，操作需在冰上進行。本產品就是為此目的根據 PCR 原理開發的試劑盒。
具有高靈敏度、高特異性、高穩定性
可在同一個管子中高特異性的執行cDNA合成與基于探針的qPCR反應。更多優點如1.的特異性；2.多重反應（高通量）；3.反應體系配置，無需冰塊；4.無懼高GC含量PCR；5.預防交叉污染；6.廣泛的設備兼容性。
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
OMG Others Human 人 OMG / OMGP (aa 1-420) 人細胞裂解液 (陽性對照) 羥丙基β環糊精;2-羥丙基-β-環糊精HPCD質量規格：>98%,藥用級

DogL1 狗肺成纖維樣細胞羧甲基殼聚糖Carboxymethyl chitosan質量規格：羧基化度80%,粘度10mPa.s~80mpa.s(cps);氧羧甲基

CM-M085小鼠表皮角化細胞*培養基100mLExaparin 質量規格：BR，細胞培養級；Anti-factor Xa activity(dried substance)：90.0~125.0IU/mg；Anti-factor Ⅱa activity(dried substance) ：20.0~35.0IU/mg。符合USP35標準

EPC, 大鼠血管內皮祖細胞(標準品)Exaparin 質量規格：效價測定

EB病毒轉化的人B細胞;KMY0902 胎兒表皮角化細胞*培養基 100mL（標準品）Trimebutine maleate質量規格：含量測定
FCGR2A Others Human 人 CD32a / FCGR2A 人細胞裂解液 (陽性對照) β-淀粉樣蛋白(1-42),大鼠β-Amyloid Peptide (1-42), rat質量規格：>95%,BR

Rat Asocytes 大鼠星形膠質細胞血管緊張素IAngiotensin I human acetate salt hydrate質量規格：>97%,BR,人，醋酸鹽

中國倉鼠肺細胞;R 1610 [R1610]2-疊氮-1-*基乙酰-D-赤-鞘氨醇2-Azido-1-pivaloyl-D-erythro-Sphingosine質量規格：美國進口

DU 145, 人前列腺癌細胞D-赤-N,N-二甲基鞘氨醇D-erythro-N,N-Dimethylsphingosine質量規格：美國進口

人成骨肉瘤細胞;MG-63 大鼠小腸隱窩上皮細胞*培養基 100mL4-去甲氧基硫化物4-Desmethoxy Omeprazole Sulfide質量規格：美國進口
MSLN Others Human 人 MSLN / Mesothelin 人細胞裂解液 (陽性對照) 1-甲基海因（標準品）質量規格：供鑒別用1-METHYLHYDANTOIN

人胰腺星狀細胞*培養基 100mL古倫賓（標準品）質量規格：供含量測定用Columbin

BJ細胞，人皮膚成纖維細胞系 克柔念珠菌 小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B2安五脂素（標準品）質量規格：鑒別Anwuligan

FAM19A4 Protein Human 重組人 FAM19A4 / TAFA4 蛋白 (Fc 標簽)絡石苷（標準品）質量規格：含量測定tracheloside

MDA-MB-453(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 狗 CD2 人細胞裂解液 (陽性對照) 柏醇質量規格：>98%,sigma223735Coniferyl alcohol
地龍PCR鑒定試劑盒說明書小鼠腎足細胞;Mouse podocyte 小鼠肝內膽管上皮細胞*培養基 100mL2-乙氧基本甲酰錄，英文名或英文縮寫：2-Ethoxybenzoyl chloride，級別：AR，規格：100克

MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞 Mouse4-基苯-2-(二... Procaine ,≥97% 1951-5-8 25G 通用試劑

GPA33 Others Mouse 小鼠 GPA33 / Glycoprotein A33 人細胞裂解液 (陽性對照) N.N-二基十二安-N-氧化物 LDcO 1643-0