腸道腺病毒核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）

訂購信息：
 產(chǎn)品名稱：腸道腺病毒核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）
規(guī)格：50T
編號：BH-P97253
分類：熒光PCR法
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

準(zhǔn)備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份
使用及效果：
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進(jìn)行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

檢測步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。

胚胎肺成纖維細(xì)胞;WI-38三醋酸甘油酯(>98%,BR)Glycerol triacetate>98%,BR

PIEC細(xì)胞，豬髖動脈內(nèi)皮細(xì)胞 結(jié)腸癌細(xì)胞,T84細(xì)胞 CM-H061腎小球內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL鈉(>98%,BR)Glycine  salt>98%,BR

大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞;INS-1乙醇酸(>98%,BR)Glycolic acid>98%,BR

RK1 Others Human  kA / RK1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 硬脂酸單甘油酯(>98%,BR)GMS, glycerol monostearate>98%,BR

心肌細(xì)胞Many types of cells　5 ×105方(1ml)氯化金Gold (III) chloride tetrahydrateBC
結(jié)腸平滑肌細(xì)胞cDNAHCSMC cDNAAR,≥99.8% carbonate anhydrous

NCL-H460細(xì)胞，非小細(xì)胞肺癌 肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞,HPAEC細(xì)胞 肝動脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells　5 × 105方(1ml)D-果糖>99%,BRD-Fructose

犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)核黃素1酸鈉水合物核黃素73.0 ~79.0%Riboflavin 5'-monophosphate  salt hydrate

TNFRSF10A Others Human  TNFRSF10A / CD261 / APO2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 溴化乙錠溶液，10 mg/ml>98%,BREB, Ethidium bromide stock solution, 10 mg/ml

CL-0231TE-1(食管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2APMSF(進(jìn)分)進(jìn)分,sigma A6664p-APMSF,
腸道腺病毒核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）RajiButt's瘤細(xì)胞 Raji human Butt's lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS葡聚糖T7shēng huà shì jì容量：50毫克

FGF12 Protein Canine 重組狗 FGF12 蛋白4-肖基-L-本炳安醋 4-nitno-3-phqnyl-L-clcninq 949-99-2

AML-193(急性單核細(xì)胞白血病單核細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 神經(jīng)細(xì)胞HN尿酸酶shēng huà shì jì容量：25克

腎小球內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHRGEC cDNACOOMASSIEBRILLIANTBLUEG-250考馬斯亮蘭G-250超級藍(lán)色至紅色結(jié)晶粉末RTsigma

IFNGR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 12027-06-4化銨;化铔AMMoniuM iodide