多食棘阿米巴屬通用PCR檢測試劑盒說明書

多食棘阿米巴屬通用PCR檢測試劑盒說明書組成及試劑配制:
1、 酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
多食棘阿米巴屬通用PCR檢測試劑盒說明書3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

樣本采集、存放及運輸：
多食棘阿米巴屬通用PCR檢測試劑盒說明書1、樣本采集：各類型樣本按照常規方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可保存，但應避免反復凍融（zui多凍融3次）；
3、運輸：采用泡沫箱加冰密封進行運輸。

特點優勢：
    1.特異性：所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
    2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
    3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
    5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

    6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。

反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。

phospho-Dnmt1(Tyr399) 磷酸化DNA甲基轉移酶1抗體

DHCR7 7脫氫還原酶抗體

Dbx2 大腦發育同源蛋白2抗體

DEGS1 退行性精母細胞同源物1抗體

DSCC1 DSCC1蛋白抗體

DcR2 誘捕受體2抗體

DMAP1 DNA甲基轉移酶相關蛋白1抗體

DMC1 減數分裂同源蛋白DMC1抗體

DNA Ligase III DNA連接酶3抗體

phospho-DNA PKcs (Thr2638) 磷酸化DNA依賴性蛋白激酶抗體

phospho-DNA PKcs (Thr2647) 磷酸化DNA依賴性蛋白激酶抗體

DNA polymerase delta p50 DNA聚合酶δ2/DNA pol δ 2抗體

DNA Polymerase delta, catalytic subunit DNA聚合酶δ催化亞單位/DNA pol δ cat抗體

DNA polymerase eta DNA聚合酶η抗體

DNA Polymerase gamma DNA聚合酶γ/DNA pol γ抗體

DNA Polymerase iota DNA聚合酶ι/DNA pol ι抗體

DNA Polymerase Kappa/POLK DNA聚合酶κ/DNA pol κ抗體

DNA Polymerase lambda DNA聚合酶λ/DNA pol λ抗體

DNA polymerase mu DNA聚合酶μ/DNA pol μ抗體

DNAJA2 細胞周期蛋白3抗體

DNAJC9 DNAJC9蛋白抗體

Dnmt2 DNA甲基轉移酶2抗體

Dnmt3L DNA甲基轉移酶3L抗體

DPP10 二肽基肽酶10抗體

DPP3 二肽氨基肽酶3抗體

DREF DNA復制相關元件結合因子抗體

DRIL1 B淋巴細胞轉錄調節相關蛋白DRIL1抗體

DRIP130 轉錄共激活因子130抗體

Drosha 核糖核酸酶3/Drosha抗體

DTYMK 脫氧胸苷酸激酶DTYMK抗體

多食棘阿米巴屬通用PCR檢測試劑盒說明書DUSP10 雙特異性蛋白磷酸酶10抗體

DUSP5 雙特異性蛋白磷酸酶5抗體

phospho-Dynamin 1 (Ser774) 磷酸化酶動力蛋白1抗體

Dynamin 1 酶動力蛋白1抗體

phospho-Dynamin 1 (Ser778) 磷酸化酶動力蛋白1抗體

Dynorphin A 腦啡肽A抗體

DMWD 強直性肌營養不良相關蛋白9抗體

DYX1C1 DYX1C1蛋白抗體

DZIP3 E3泛素蛋白連接酶dzip3抗體