牛支原體PCR檢測試劑盒說明書

牛支原體PCR檢測試劑盒說明書組成及試劑配制:
1、 酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、牛支原體PCR檢測試劑盒說明書 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

牛支原體PCR檢測試劑盒說明書樣本采集、存放及運輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可保存，但應避免反復凍融（zui多凍融3次）；
3、運輸：采用泡沫箱加冰密封進行運輸。

特點優勢：
    1.特異性：所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
    2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
    3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
    5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

    6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。

反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。

腺相關病毒5 VP1抗體 英文縮寫： AAV5 capsid protein VP1

脂肪醛脫氫酶抗體 英文縮寫： ALDH3A2

抗利尿激素1A抗體 英文縮寫： AVPR1A

抗利尿激素受體1B抗體 英文縮寫： AVPR1B

二磷酸腺苷核糖基化因子核苷酸交換因子2抗體 英文縮寫： ARFGEF2

α增強子結合蛋白1抗體 英文縮寫： ATBF1

脊髓小腦共濟失調10抗體 英文縮寫： ATXN10

蛋白激酶A錨定蛋白7抗體 英文縮寫： AKAP7

腺苷三磷酸結合盒轉運體12抗體 英文縮寫： ABCA12

腺苷三磷酸結合盒轉運體9抗體 英文縮寫： ABCB9

三磷酸腺苷結合盒轉運蛋白4抗體 英文縮寫： ABCD4

肌動蛋白結合蛋白LIM3抗體 英文縮寫： ABLIM3

高爾基復合體相關蛋白1抗體 英文縮寫： ACBD3

乙酰羧化酶1ACCα抗體 英文縮寫： ACACA

腺嘌呤核苷酸轉運蛋白1、2、3、4抗體 英文縮寫： ANT1+ANT2+ANT3+ANT4

牛支原體PCR檢測試劑盒說明書去整合素樣金屬蛋白酶12 英文縮寫： ADAM12

磷酸化乙酰羧化酶1ACCα抗體 英文縮寫： Phospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79)

膜粘連蛋白2受體抗體 英文縮寫： AX2R

晚期糖基化終末產物特異性受體抗體 英文縮寫： AGER