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      HCT116人結(jié)腸癌細胞

      更新時間:2024-12-05

      簡要描述:

      HCT116人結(jié)腸癌細胞公司正在出售的產(chǎn)品:FAAH2: 脂肪酸酰胺水解酶2抗體 GPA33 Others Mouse 小鼠 GPA33 / Glycoprotein A33 人細胞裂解液 (陽性對照)
      淋巴管內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) 豚鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒 IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記的驢抗兔IgG 0.1m

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      公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!


      1、細胞傳代:

      1)細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時,棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細胞一次;

      2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入 5ml 培養(yǎng)

      液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;

      3)棄上清,沉淀細胞用 1-2ml 培養(yǎng)基重懸,然后按 1:2 比例進行分瓶傳代,最后放入 37℃,5%CO2細胞

      培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

      產(chǎn)品名稱

      規(guī)格

      貨號

      HCT116人結(jié)腸癌細胞

      1×106

      P-X735

      一、商品介紹:

      產(chǎn)品名稱

      HCT116人結(jié)腸癌細胞

      種屬

      細胞別稱

      HCT-116; HCT.116;   HCT_116; HCT116; CoCL2;人結(jié)腸癌細胞

      年齡性別

      男;成年

      生長特性

      貼壁生長

      組織來源

      結(jié)直腸癌

      細胞形態(tài)

      上皮細胞樣

      背景簡介

      HCT1161979M.Brattain等從患結(jié)腸癌的男性病人中分離的三株惡性細胞之一。 在半固體瓊脂糖培養(yǎng)基中形成克隆。HCT116在無胸腺的裸鼠有致瘤性,形成上皮樣的腫瘤。

      生物安全等級

      1

      細胞規(guī)格

      1×106

      支原體檢測

      基因表達情況

      carcinoembryonic   antigen (CEA) 1 ng per 1×10^6   cells per 10 days.

      保藏機構(gòu)

      ATCC; CCL-247   BCRC; 60349 BCRJ; 0288 DSMZ; ACC-581

      培養(yǎng)基

      McCoy's 5a+10%   FBS+PS

      培養(yǎng)條件

      氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37

      凍存條件

      無血清凍存液,液氮儲存

      倍增時間

      ~25-48 hours

       



      2、細胞凍存:

      1)細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時,棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細胞一次;

      2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終

      止消化,輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;

      3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細胞,并放置于凍存管中;

      4)先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h 后轉(zhuǎn)入液氮中進行長期保存。使用程序

      降溫盒可直接放入-80℃。

      二、細胞培養(yǎng)操作

      1) 復蘇細胞:以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

      2) 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

      a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

      b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

      c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數(shù)。

      b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。


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      公司正在出售的產(chǎn)品:

      MLL5: 髓系/淋巴混合譜系白血病蛋白5抗體 DKK1 Others Rhesus 恒河猴 DKK-1 / Dkk1 人細胞裂解液 (陽性對照)

      3T3-L1, 小鼠前脂肪細胞 大鼠血管內(nèi)皮生長因子受體3(VEGFR3)ELISA試劑盒 F1+2 (Rabbit prothrombin fragment 1+2)  兔原片段F1+2 96T

      MPV17 T淋巴細胞成熟相關(guān)蛋白抗體 T739小鼠肺腺癌瘤株;LA795

      NCI-H1688(人典型小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 3T6-Swiss albino(胚胎成纖維細胞) 大鼠血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR2)ELISA試劑盒 Ricinus communis agglutinin,RCA  蓖麻凝集素 96T

      cblA: 甲基尿癥cblA抗體 瘤牛皮膚細胞;BIN-S1

      HIP55/DBNL: 宮頸黏液蛋白相關(guān)蛋白抗體 水貂肺上皮細胞;Mv.1.Lu(NBL-7) T淋巴細胞白血病細胞,Jurkat,Clone E6-1細胞 MPC-83細胞,小鼠胰腺腺泡細胞癌細胞

      RK2 Others Rat 大鼠 kB / RK2 人細胞裂解液 (陽性對照) 人孤腓肽(OFQ/N)ELISA 試劑盒 Cyclin A 周期素A抗原 0.5mg

      H3N8 hemagglutinin: 流感病毒H3N8血凝素抗體 CL-0122HUVEC(HUV-EC-C) (人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞)5×106cells/瓶×2

      UM細胞,人葡萄膜黑色素細胞 土曲霉 人胃癌細胞;MKN-45 人鉤端螺旋體抗體(Lep-Ab)ELISA試劑盒 Cyclin B1 周期素B1抗原 0.5mg

      H3N7 hemagglutinin: 流感病毒H3N7血凝素抗體 COCH Others Human COCH / Cochlin ( isoform short ) 人細胞裂解液 (陽性對照)

      HCT116人結(jié)腸癌細胞人胚肝二倍體細胞;CCC-HEL-1 人支氣管上皮細胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠肝表達趨化因子(LEC)ELISA 試劑盒 ET-1  大鼠內(nèi)皮素1 96T

      PTCHD3: 修補相關(guān)蛋白PTCHD3抗體 人顱骨成骨細胞HCO

      MDK Protein Human 重組人 Midkine / MDK 蛋白 大鼠肝癌源性生長因子(HDGF)ELISA試劑盒 Human paramyxovirus parotitis IgG  人腮腺炎病毒IgG 96T

      PKMYT1: 髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1激酶抗體 ANGPTL7 Others Canine ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 人細胞裂解液 (陽性對照)

      MDA-MB-435S 人導管癌細胞 大鼠肝X受體β(LXRβ)ELISA試劑盒 BK  大鼠血管舒緩激肽 96T


      三、培養(yǎng)注意事項 

      1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

      2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,責任由 客戶自行承擔。

      3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

      4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

      5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

      6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

      7. 該細胞僅供科研使用。

      8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。     收到細胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。

      9. 注意:  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。



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