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      MCF-10A人乳腺上皮細胞

      更新時間:2024-12-05

      簡要描述:

      MCF-10A人乳腺上皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品:肝動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) 豚鼠白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
      FRAT1: 原癌基因FRAT1抗體 RA, 大鼠星形膠質(zhì)細胞 Rattus
      HPASMC-c 人肺動脈平滑肌細胞(

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      公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!

      產(chǎn)品名稱

      規(guī)格

      貨號

      MCF-10A人乳腺上皮細胞

      1×106

      P-X833

       


      1、細胞傳代:

      1)細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時,棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細胞一次;

      2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入 5ml 培養(yǎng)

      液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;

      3)棄上清,沉淀細胞用 1-2ml 培養(yǎng)基重懸,然后按 1:2 比例進行分瓶傳代,最后放入 37℃,5%CO2細胞

      培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

      2、細胞凍存:

      1)細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時,棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細胞一次;

      2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終

      止消化,輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;

      3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細胞,并放置于凍存管中;

      4)先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h 后轉(zhuǎn)入液氮中進行長期保存。使用程序

      降溫盒可直接放入-80℃。

      二、細胞培養(yǎng)操作

      1) 復蘇細胞:以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

      2) 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

      a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

      b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

      c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數(shù)。

      b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。


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      三、培養(yǎng)注意事項 

      1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

      2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,責任由 客戶自行承擔。

      3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

      4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

      5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

      6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞 的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

      7. 該細胞僅供科研使用。

      8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。     收到細胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。

      9. 注意:  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

      公司正在出售的產(chǎn)品:

      Midnolin: 中腦核仁蛋白抗體 IL13RA2 Others Mouse 小鼠 IL13RA2 / CD213A2 人細胞裂解液 (陽性對照)

      NSC,大鼠神經(jīng)干細胞 大鼠胸腺激活調(diào)節(jié)趨化因子(TARC)ELISA試劑盒 Mouse angiotension II ,ANG- II  小鼠血管緊張素Ⅱ 96T

      MYH7B: 肌球蛋白重鏈7抗體 BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1

      NCI-H226(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 VERO C1008 (E6)(非洲綠猴腎細胞) 大鼠胸腺基質(zhì)淋巴細胞生成素(TSLP)ELISA試劑盒 ACE II  大鼠血管緊張素Ⅱ轉(zhuǎn)化酶 96T

      MYOM1: 肌間蛋白1抗體 兔間變表皮鱗癌瘤株;VX2

      HBQ1: 血紅蛋白theta亞型1抗體 CL-0066COLO 205(人結腸癌細胞)5×106cells/瓶×2

      Y79細胞,人視網(wǎng)膜母細胞瘤 球毛殼霉 小鼠肺腺癌細胞系;LA795 人鈣調(diào)0酸酶(CaN)ELISA 試劑盒 EGFL7(EGF-like domain containing protein 7) 類表皮生長因子域7抗原 0.5mg

      HBS1L hbs1樣蛋白抗體 MMP2 Others Human MMP-2 / CLG4A 人細胞裂解液 (陽性對照)

      盤羊皮膚細胞;ASHS2 人鈣調(diào)結合蛋白(CALD)ELISA 試劑盒 Egr-1(Early growth response 1) 早期反應基因-1/應急反應生長基因1抗原 0.5mg

      HCAP G: 縮素復合物亞型蛋白3抗體 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞(拉祜族);KM9406

      MCF-10A人乳腺上皮細胞PCDHGB5: 原鈣粘蛋白γB5抗體 Hs 683細胞,人腦視神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞 人癌細胞,MDA-MB-468細胞 動物上皮細胞培養(yǎng)基EpiCM-a

      EGF Others Mouse 小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠輔肌動蛋白α2(ACTN2)ELISA試劑盒 T3  大鼠狀腺原酸 96T

      Proteasome 20S alpha 5: 蛋白酶體PSMα5抗體 CM-H069人膀胱平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL

      NCI-H1395人肺腺癌細胞 Human lung adenocarcinoma cell line NCI-H1395 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠封閉蛋白5(CLDN5)ELISA試劑盒 HEV-IgG(Human hepatitis E virus IgG)  人戊型肝炎病毒IgG 96T

      PNPLA6: 含patatin0脂酶6抗體 LXN Others Human Latexin / LXN / TCI 人細胞裂解液 (陽性對照)




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