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      B16小鼠黑色素瘤細(xì)胞

      更新時(shí)間:2024-11-17

      簡(jiǎn)要描述:

      B16小鼠黑色素瘤細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:LM3細(xì)胞,人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞 小鼠白血病細(xì)胞,M1細(xì)胞 犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2) 小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA試劑盒 SCN4B: 通道亞基β4抗體 SLAMF6 Others Human 人 Ly108 / SLAMF6 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
      人支氣管平滑肌細(xì)胞裂解物HBSMCL 小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA 試劑盒 S

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      公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!

      1、細(xì)胞傳代:

      1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時(shí),棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細(xì)胞一次;

      2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入 5ml 培養(yǎng)

      液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;

      3)棄上清,沉淀細(xì)胞用 1-2ml 培養(yǎng)基重懸,然后按 1:2 比例進(jìn)行分瓶傳代,最后放入 37℃,5%CO2細(xì)胞

      培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

      2、細(xì)胞凍存:

      1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時(shí),棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細(xì)胞一次;

      2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終

      止消化,輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;

      3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;

      4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h 后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。使用程序

      降溫盒可直接放入-80℃。

      產(chǎn)品名稱

      規(guī)格

      貨號(hào)

      B16小鼠黑色素瘤細(xì)胞

      1×106

      P-X1031

      一、商品介紹:

      產(chǎn)品名稱

      B16小鼠黑色素瘤細(xì)胞

      種屬

      C57BL/6小鼠

      細(xì)胞別稱

      B-16; B16   melanoma; B16 subline B78; B78

      年齡性別


      生長特性

      貼壁生長

      組織來源

      皮膚

      細(xì)胞形態(tài)

      成纖維細(xì)胞樣

      背景簡(jiǎn)介

      B16細(xì)胞源于C57BL/6J小鼠黑色素瘤,可以產(chǎn)生黑色素,同基因小鼠體內(nèi)移植可成瘤

      生物安全等級(jí)

      1

      細(xì)胞規(guī)格

      1×106

      支原體檢測(cè)

      基因表達(dá)情況


      保藏機(jī)構(gòu)

      JCRB; JCRB0202   KCB; KCB 93030YJ RCB; RCB1283 TKG; TKG 0144

      培養(yǎng)基

      90% RPMI-1640+10%   FBS+PS

      培養(yǎng)條件

      氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37

      凍存條件

      無血清凍存液,液氮儲(chǔ)存

      倍增時(shí)間


       


      二、細(xì)胞培養(yǎng)操作

      1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

      2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

      a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

      b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細(xì)胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細(xì)胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

      c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

      b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。


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      公司正在出售的產(chǎn)品:

      FGF1 Protein Human 重組人 aFGF / FGF1 蛋白 大鼠脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA 試劑盒 Avidin/RBITC 羅丹明標(biāo)記親合素 0.1ml

      Listeriolysin: 李斯特菌溶胞素抗體 IL3 Others Rat 大鼠 IL3 / ierleukin 3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

      大鼠卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠脂蛋白關(guān)聯(lián)0脂酶A2(LpPLA2)ELISA試劑盒 Protein A/RBITC 羅丹明標(biāo)記蛋白A 0.3ml

      LCMT1: 亮酸羧基甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體 A549, 人肺癌細(xì)胞系 T細(xì)胞白血病細(xì)胞,HPB-ALL細(xì)胞 RKO(結(jié)腸腺癌細(xì)胞)

      BPI Others Human BPI 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 大鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒 Bovine IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記IgG 0.3ml

      HIPK3 Fas相互作用蛋白激酶3抗體 人正常上皮細(xì)胞;MCF 10A

      RBL-1(大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體(SDA)ELISA 試劑盒 Annexin A 膜粘連蛋白 A抗原 0.5mg

      HHV8 ORF50: 人類皰疹病毒8抗體 TGFB1 Others Mouse 小鼠 TGF-beta 1 / TGFB1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

      U-2 OS人骨肉瘤細(xì)胞 U-2 human osteosarcoma cell line OS McCoy's 5A+10%FBS 人抗脫氧核糖核蛋白抗體(DNP-Ab)ELISA 試劑盒 G Protein(Guanine nucleotide-binding regulatory protein) G蛋白(鳥苷酸結(jié)合蛋白)(抗原) 0.5mg

      Phospho-HSP27 (Ser82) 0酸化熱休克蛋白27抗體 犬腎細(xì)胞;MDCK/IgR BALB/C小鼠胚成纖維細(xì)胞,BALB/3T3細(xì)胞 RYTF細(xì)胞,兔眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞

      B16小鼠黑色素瘤細(xì)胞SDC4 Others Mouse 小鼠 Syndecan-4 / SDC4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 大鼠己糖激酶1(HK1)ELISA試劑盒 DPP IV (Mouse dipeptidyl peptldase IV )  小鼠二肽基肽酶Ⅳ 96T

      P4HTM: 脯酸水解酶4抗體 CL-0273ECV-304(人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

      293 Cells, low passage人胚腎細(xì)胞 293 Cells, low and passage in human embryo kidney cell 人胚腎細(xì)胞 大鼠己糖激酶(HK)ELISA試劑盒 MMP-5  大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5 96T

      PHAPI2: 酸性核0蛋白32家族B抗體 RK3 Others Human kC / RK3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

      人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5 大鼠己糖激酶(HK)ELISA 試劑盒 ATG(Human anti-thymocyte globulin)  人抗胸腺細(xì)胞球蛋白 96T


      三、培養(yǎng)注意事項(xiàng) 

      1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

      2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

      3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

      4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

      5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

      6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

      7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

      8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。

      9. 注意:  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。


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