更新時間:2024-11-22
DH10Bac 感受態細胞100ul*50菌株一種常用于質粒克隆的菌株。其φ80lacZΔM15基因的產物可與pUC載體編碼的b-半乳糖苷酶氨基端實現a互補,可用于藍白斑篩選。recA1和endA1 的突變有利于克隆DNA 的穩定和高純度質粒DNA的提取。
DH10Bac 感受態細胞100ul*50以下是的訂購信息儲存條件:-70℃凍存
操作方法:
1. 取-80℃保存的農桿菌感受態于室溫或手心片刻待其部分融化,處于冰水混合狀態時插入冰中。
2.每100 μl感受態加入0.01-1 μg質粒DNA(轉化效率較高,*次使用前做預實驗確定所加質粒的量),用手管底混勻,依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
DH10Bac 感受態細胞100ul*503. 加入700 μl無抗生素的LB或YEB液體培養基,于28℃振蕩培養2~3小時。
4. 6000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培養箱培養2-3天
注意事項
1. 加入質粒時體積不應大于感受態體積的1/10;質粒不純或存在乙醇等有機物污染,轉化效率急劇下降;質粒增大一倍,轉化效率下降一個數量級。
2. 混入質粒時應輕柔操作。轉化高濃度的質粒可相應減少終用于涂板的菌量。
3. 平板上陽性克隆密度過大時,由于營養不足,陽性克隆生長變慢,菌落變小,為了獲得大的菌落,應減少質粒用量。
DH10Bac 感受態細胞100ul*504. 濃度不應高于25 μg/ml,過高的濃度不利于農桿菌生長,會降低其生長速度和轉化效率。本公司感受態計算轉化效率時所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif則轉化效率降低到1/2。
5. 培養基中加入的目的是防止雜菌生長、篩選農桿菌;根據所用菌株抗性加入Ti質粒篩選抗生素可防止Ti質粒丟失,但Ti質粒篩選抗生素不利于農桿菌的轉基因操作,所以一般培養農桿菌時不考慮這些抗生素,Ti質粒丟失的概率極低(可以忽略)。
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大鼠內分泌腺來源的血管內皮生長因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒 :英文名稱; Rat Endocrine gland vascular endothelial growth factor,EG-VEGF ELISA Kit 購買我公司ELISA試劑盒保證質量,靈敏性高、特異性強、重復性好等優點已經得到廣大客戶的認可,您可放心,且我司有專門的售后部門對您進行全線跟蹤。 :規格; 96T/48T 大鼠內分泌腺來源的血管內皮生長因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒廠家 大鼠內分泌腺來源的血管內皮生長因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒報價
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大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體1(TRAIL-R1)ELISA試劑盒 :英文名稱; Rat tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 1,TRAIL R1 ELISA Kit 購買我公司ELISA試劑盒保證質量,靈敏性高、特異性強、重復性好等優點已經得到廣大客戶的認可,您可放心,且我司有專門的售后部門對您進行全線跟蹤。 :規格; 96T/48T 大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體1(TRAIL-R1)ELISA試劑盒廠家 大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體1(TRAIL-R1)ELISA試劑盒報價
DH10Bac 感受態細胞100ul*50 大鼠血小板生成素(TPO)ELISA試劑盒 :英文名稱; Rat Thrombopoietin,TPO ELISA kit 購買我公司ELISA試劑盒保證質量,靈敏性高、特異性強、重復性好等優點已經得到廣大客戶的認可,您可放心,且我司有專門的售后部門對您進行全