MSU440 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10

MSU440 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10 操作方法（以下操作均按無菌條件的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行）
1 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中，如需分裝可將剛?cè)诨?xì)胞懸液分裝到無菌預(yù)冷的離心管中，置于冰浴中。
●  一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100 μl，可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。應(yīng)注意所用DNA 體積不要超過感受態(tài)細(xì)胞懸液體積的十分之一。
以下實(shí)驗(yàn)以100 μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
MSU440 感受態(tài)細(xì)胞100ul*102 向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（100 μl 的感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng 超螺旋質(zhì)粒DNA 所飽和），輕輕旋轉(zhuǎn)離心管以混勻內(nèi)容物，在冰浴中靜置30 分鐘。
3 將離心管置于42℃水浴中放置60-90 秒，然后快速將管轉(zhuǎn)移到冰浴中，使細(xì)胞冷卻2-3 分鐘，該過程不要搖動(dòng)離心管。
4 向每個(gè)離心管中加入900 μl 無菌的SOC 或LB 培養(yǎng)基（不含抗生素）， 混勻后置于37℃搖床振蕩培養(yǎng)1 小時(shí)（160-220 轉(zhuǎn)/分鐘），目的是使質(zhì)粒上相關(guān)的抗性標(biāo)記基因表達(dá)，使菌體復(fù)蘇。
5 將離心管內(nèi)容物混勻，吸取100 μl 已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞加到含相應(yīng)抗生素的SOB 或LB 固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的彎頭玻棒輕輕的將細(xì)胞均勻涂開。將平板置于室溫直至液體被吸收，倒置平板，37℃培養(yǎng)12-16 小時(shí)。
MSU440 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10●  涂布用量可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)來調(diào)整。如轉(zhuǎn)化的DNA 總量較多，可取更少量轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板；反之，如轉(zhuǎn)化的DNA 總量較少，可取200-300 μl 轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板。如果預(yù)計(jì)的克隆較少，可通過離心（4,000 rpm, 2分鐘）后吸除部分培養(yǎng)液，懸浮菌體后將其涂布于一個(gè)平板中。（涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的轉(zhuǎn)化菌落數(shù)過少可以將剩下的菌液再涂布新的培養(yǎng)板）
MSU440 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10 注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)保存在 -70℃，不可多次凍融和放置時(shí)間過長，以避免降低感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。
2. 進(jìn)行轉(zhuǎn)化操作時(shí)，應(yīng)根據(jù)相應(yīng)溫度及無菌條件的要求進(jìn)行。
3 為防止轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)不成功，可以保留部分連接反應(yīng)液，以重新轉(zhuǎn)化，將損失降到低。
以下是的相關(guān)產(chǎn)品：

 ET 大鼠內(nèi)毒素 規(guī)格： 48T/96T

 TCC C5b-9 大鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9 規(guī)格： 48T/96T

 ANX-Ⅴ 大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ 規(guī)格： 48T/96T

 MIS/AMH 大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素 規(guī)格： 48T/96T

 IgM 大鼠免疫球蛋白M 規(guī)格： 48T/96T

 IgG 大鼠免疫球蛋白G 規(guī)格： 48T/96T

 IgE 大鼠免疫球蛋白E 規(guī)格： 48T/96T

 IgA 大鼠免疫球蛋白A 規(guī)格： 48T/96T

 OVA sIgE 大鼠卵清蛋白特異性IgE 規(guī)格： 48T/96T

大鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA Kit，48T/96T 大鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T

 TrxR 大鼠硫氧還蛋白還原酶 規(guī)格： 48T/96T

 Trx 大鼠硫氧化還原蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 PI Ab-IgG/IgM 大鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM 規(guī)格： 48T/96T

 PL-A2 大鼠磷脂酶A2 規(guī)格： 48T/96T

 PI3K 大鼠磷酸肌醇3激酶 規(guī)格： 48T/96T

 pACCase 大鼠磷酸化乙酰羧化酶 規(guī)格： 48T/96T

 AMPK 大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶 規(guī)格： 48T/96T

 pERK 大鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶 規(guī)格： 48T/96T

 P-PKC 大鼠磷酸化蛋白激酶C 規(guī)格： 48T/96T

大鼠淋巴細(xì)胞因子ELISA Kit，48T/96T 大鼠淋巴細(xì)胞因子ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T

 Lptn/LTN/XCL1 大鼠淋巴細(xì)胞趨化因子 規(guī)格： 48T/96T

 LFA-3/CD58 大鼠淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3 規(guī)格： 48T/96T

 GM-CSF 大鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子 規(guī)格： 48T/96T

 G-CSF 大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子 規(guī)格： 48T/96T

 CC16 大鼠克拉拉細(xì)胞蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 sTRAIL 大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體 規(guī)格： 48T/96T

 sPECAM-1 大鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1 規(guī)格： 48T/96T

 sVCAM-1 大鼠可溶性血管細(xì)胞粘附分子1 規(guī)格： 48T/96T

MSU440 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10 sEPCR 大鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體 規(guī)格： 48T/96T

 sICAM-1 大鼠可溶性細(xì)胞間粘附分子1 規(guī)格： 48T/96T

 sLR 大鼠可溶性瘦素受體 規(guī)格： 48T/96T