副流感病毒3型核酸檢測試劑盒

產品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

訂購信息：
 產品名稱：副流感病毒3型核酸檢測試劑盒
規格：50T
編號：BH-P96358
分類：熒光PCR法
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。

準備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產品說明書                                   1份
使用及效果：
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。

檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應體系配制如下表：
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。
非洲綠猴腎細胞;VEROA1醇Erythromycin A Enol Ether美國進口

RKO細胞，結腸癌細胞 皮膚色素瘤細胞,SK-MEL-1細胞 B細胞瘤細胞;RAMOS乳糖醛酸Erythromycin lactobionate美國進口

HCT-8(盲腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2脫氫Dehydro Nisoldipine美國進口

ANPEP Others Human  ANPEP / CD13 細胞裂解液 (陽性對照) 4-羥基4-Hydroxy Nisoldipine美國進口

胚胎心臟成纖維樣細胞;HEH2外消旋酰胺rac-Ibuprofen Amide美國進口
CL-0350Hela S3(細胞)5×106cells/瓶×2膽硫酸酯鈉鹽>98%,BR cholesteryl sulfate

EPHB2 Others Human  EphB2 / Hek5 細胞裂解液 (陽性對照) O-叔丁基-L-甲酯鹽酸鹽0.98O-tert-Butyl-L-serine methyl ester

肺成纖維細胞總RNAHPF NAL-甲酯鹽酸鹽>98%,BRL-Valine methyl ester 

Hs-578T細胞，癌細胞 SD大鼠骨髓間充質干細胞,SDBMSC細胞 Hep-2, 喉癌細胞系L-抗壞血酸鈉>98%,BR L-ascorbate

NCI-H661(大細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2焦1酸鈉(AR)>99%,AR pyrophosphate
副流感病毒3型核酸檢測試劑盒CFR Others Rat 大鼠 CFR / CFR-alpha 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (S)-腺苷，環3',5'-（氫化硫代1酸酯）三乙基胺美國進口(S)-Adenosine, cyclic 3',5'-(hydrogenphosphorothioate) triethylammonium

豬腎細胞;PK-152'-脫氧-β-L-腺苷美國進口2'-Deoxy-β-L-adenosine 

R 1610細胞，中國倉鼠體細胞 胰腺癌細胞,PC-3細胞 CM-R101大鼠腦動脈血管平滑肌細胞*培養基100mL異鳥苷水合物美國進口Isoguanosine Hydrate

大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞;RBL-2H33,5-O-(1,1,3,3-四異丙基-1,3-二硅氧烷)腺苷美國進口3',5'-O-(1,1,3,3-Tetraisopropyl- 1,3-Disloxanediyl)Adenosine 

IL4R Others Human  IL4R / CD124 細胞裂解液 (陽性對照) 21-乙酰氧基孕1醇酮BR,美國進口21-Acetoxypregnenolone