牛白血病病毒核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）

訂購信息：
 產(chǎn)品名稱：牛白血病病毒核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）
規(guī)格：50T
編號：BH-P96643
分類：熒光PCR法
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。

準備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份
使用及效果：
產(chǎn)品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設(shè)置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。

小膠質(zhì)細胞總RNAHM NA七水(AR)Iron(II) sulfate, heptahydrateAR,>99%

CD68 Others Rat 大鼠 CD68 / Macrosialin 細胞裂解液 (陽性對照) 1酸三鉀Potassium phosphate, tribasic>98%

上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL鈣黃綠素二鈉鹽Calcein,  saltIND grade

COS-7細胞，SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞 293T/17 [HEK 293T/17] (胚腎細胞) 雜交瘤(B類);Z1510C6D10F4G6植酸鈉Phytic acid dodeca salt hydrate>98%,BR

EFNB2A Protein Danio rerio (zebrafish) 重組斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 蛋白 (His 標簽)菊粉;菊糖Inulin from chicory>90%,BR
Hela, 細胞系 小鼠成纖維細胞,3T3TK細胞 SPA-A1(肺腺癌細胞)泡蛙肽>95%,BRPhysalaemin

小鼠單核巨噬細胞白血病細胞;RAW 264.7 [RAW264.7PKI-tide>95%,BRPKI-tide

FGFR2 Others Human  FGFR2 / CD332 細胞裂解液 (陽性對照) 血小板因子4>95%,BRPlatelet Factor 4 (58-70)(human)

小鼠子細胞;U14Pneumadin，>95%,BRPneumadin (human)

IL18R1 Others Canine 狗 IL18R1 細胞裂解液 (陽性對照) 1酸鋅四水(>98%,BR)>98%,BRZinc phosphate tetrahydrate
牛白血病病毒核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）CD80 Others Human  B7-1 / CD80 細胞裂解液 (陽性對照) TRICINE三羥甲基甲基甘酸1克IND

肝細胞RNAHH miRNA5 μg1-十二流醇 1-Dodqccnqthiol 11-22-0

大鼠心肌細胞(RCM)(1×106)M-TGE肉湯shēng huà shì jì容量：500毫升

荷蘭白花奶肺細胞;DCL1錄化-2-羥基-3-(基)基聚環(huán)氧纖維素，英文名或英文縮寫：Polyquaternium-10，級別：IND，規(guī)格：25克

T739小鼠肺腺癌瘤株;LA795 小鼠腎成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mLAgar 250g/500g/1kg /5kg Japan