莫氏立克次體核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）

訂購信息：
 產品名稱：莫氏立克次體核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）
規格：50T
編號：BH-P96620
分類：熒光PCR法
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。

準備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產品說明書                                   1份
使用及效果：
產品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。

檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應體系配制如下表：
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。

小鼠單核巨噬細胞白血病細胞;RAW 264.7 [RAW264.7 CEFADROXIL>950µg/mg,BR

ERBB3 Others Rhesus 恒河猴 HER3 / ErbB3 細胞裂解液 (陽性對照) D- D-pantothenate >98%,BR

CFPAC-1 胰腺癌細胞依度沙班;伊多塞班Edoxaban>99%,BR

SW 1990胰腺癌細胞系 1990 human pancreatic cancer cell line SW L-15+10%FBS牛防風素;6-甲氧基當歸素SphondinHPLC>97%

CD40LG Protein Canine 重組狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白6-羥基()6-Hydroxycoumarin>98%(GC),
VDR Others Mouse 小鼠 VDR / NR1I1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 大孔柱層析硅膠(300-400目,FCP Grade)Silica gel for column chromatography300-400目,層析用

rEPC，大鼠內皮祖細胞-骨髓硅酸(>98%,BC)Silicic acid hydrate>98%,BC

rCSC, 大鼠心肌細胞 [CIP 104328;IAM 13570;ICMP 5794;NCPPB 2991]細胞 HBL-100(整合SV40 基因的上皮細胞)一氧化硅(>99%,BR)Silicon monoxide>99%,BR

T瘤細胞Jurkat亞系;Jurkat77鎢硅酸(>98%,BR)Silicotungstic acid hydrate>98%,BR

SERPINA3C Others Mouse 小鼠 SERPINA3C / Serpina3c 細胞裂解液 (陽性對照) 乙酸銀(>99%,BR)Silver acetate>99%,BR
莫氏立克次體核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）食道平滑肌細胞 (HESMC)( 5×105 ) RN-s, 大鼠紋狀體神經元 Rattus鹽酸脫氧，英文名或英文縮寫：Doxycycline HCl，級別：15000～150000,液體,7條帶，規格：100毫克

牛腎細胞;MDBK(NBL-1)3,3,5-三基環(順反混合物) 3,3,5-Trimqthylcyclohqxcnol 116-0-9

PDGFRA Others Rat 大鼠 PDGFRa / CD140a 細胞裂解液 (陽性對照) ACRYLAMIDE酰胺蛋白組學級白色結晶RTsigma

CL-0173NRK(大鼠腎細胞)5×106cells/瓶×2阿糖腺嘌吟，英文名或英文縮寫：Ara-A，級別：超，98%，規格：1克

HepG2細胞，肝細胞癌 T瘤細胞系,Hut-102細胞 小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3673-06-3D-本;D-2-基-3-本基;D-α-基-β-本;D-α-基氫化肉桂酸D-pxenylalanine;D-α-AMino-β-pxenylpropionic acid;(R)-(+)-pxenylalanine;(R)-2-AMino-3-pxenylpropionic acid;D-β-pxenylalanine