隱孢子蟲核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）

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訂購信息：
 產(chǎn)品名稱：隱孢子蟲核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）
規(guī)格：50T
編號：BH-P96562
分類：熒光PCR法
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。

準(zhǔn)備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份
使用及效果：
產(chǎn)品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

檢測步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設(shè)置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。

心肌細胞 (HCM) (1×106 ) HET-1A, 食管上皮細胞 Human新綠原酸()Neochlorogenic acidHPLC >98%,

小鼠垂體細胞MPC鹽酸伊伐布雷定Ivabradine HCl>98%,BR

EPHA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphA4 細胞裂解液 (陽性對照) 葉黃素; 二羥基-d-胡蘿卜素XanthophyllUV>90%,HPLC>80%,BR

大鼠成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL葉黃素; 二羥基-d-胡蘿卜素XanthophyllUV>40%,BR

MC38小鼠結(jié)腸癌細胞 MC38 mouse colon cancer cells DMEM+10%FBS葉黃素; 二羥基-d-胡蘿卜素()XanthophyllHPLC>85%,
U-373MG-EGFP(Ubc-EGFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞 U-373MG-EGFP (Ubc-EGFP leiviral consuct stable sain) of human brain glioma cells DMEM+10% FBS()含量測定Nitrendipine

IL2 Protein Mouse 重組小鼠 Ierleukin-2 / IL-2 蛋白華蟾毒它靈;華蟾素()HPLC≥98%，Cinobufotalin

成纖維母細胞-新生兒(HDF-n)( 5×105 ) MA, 小鼠星形膠質(zhì)細胞 Mouse維甲酰酚胺>98%,BRFenretinide(4-HPR)

鼬肺上皮細胞;MV-1-Lu2-氨基嘌呤,異腺嘌呤;異腺素;2-AP>98%,BR2-Aminopurine

MFGE8 Others Human  MFG-E8 / lactadherin / MFGE8 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 尼羅替尼-d3美國進口Nilotinib-d3
隱孢子蟲核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）CD226 Others Human  CD226 / DNAM-1 細胞裂解液 (陽性對照) GUANIDINExy7noCHLORIDE鹽酸胍蛋白組學(xué)級100G1950-1-1RT

脊髓星形膠質(zhì)細胞裂解物HA-sp L本加醋銨;安息香醋銨 cMMoniuM bqnzoctq 1863-63-4

CD55 Others Rat 大鼠 CD55 / DAF 細胞裂解液 (陽性對照) 二丁基安 Dibutylcminq 111-9-

小腦顆粒細胞*培養(yǎng)基 100mL甲基紅鈉1公斤

NRK細胞，大鼠腎小管上皮細胞 PT-67(病毒轉(zhuǎn)染小鼠細胞) 豬腎細胞;PK(15)(腦心浸液瓊脂)