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      登革病毒3型核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)

      更新時間:2024-12-01

      簡要描述:

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      BHK細胞,幼倉鼠腎細胞 胰腺癌細胞,CFPAC-1細胞 CM-R093大鼠胎兒成纖維細胞*培養基100mL1-十八1()1-Octadecene分析,≥99.5%(GC)
      大鼠胰腺外分泌腺細胞;AR42J辛胺()n-Octylamin

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      訂購信息:
       產品名稱:登革病毒3型核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)
      規格:50T
      編號:BH-P96507
      分類:熒光PCR
      儲存條件:-20避光保存,避免反復凍融。
      運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

      準備物品:
      清理液(A                                   毫升
      染色液(t B                                   微升
      稀釋液(C                                   毫升
      溶解液(tD                                   毫升
      產品說明書                                   1
      使用及效果:
      產品特點:
      高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
      高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
      操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
      高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

      PCR反應特點
      (1) 特異性強
      PCR反應的特異性決定因素為:
      引物與模板DNA特異正確的結合;
      堿基配對原則;
      Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
      靶基因的特異性與保守性。
      其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區,其特異性程度就更高。
      (2) 靈敏度高
      PCR產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
      (3) 簡便、快速
      PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在24 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
      (4) 對標本的純度要求低
      不需要分離病毒或細菌及培養細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。

      檢測步驟:
      一、 試劑的準備
      從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s
      設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
      試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
      熒光PCR反應液 14µL N×14µL
      酶混合物 1 µL N×1 µL
      總量 15 µL N×15µL
      1 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的NPCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL10000rpm瞬時離心10秒。
      7.2 qPCR反應條件
      將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
      循環條件:
      1
      循環 50 for 2 min
      預變性 1循環 95 for 10 min
      PCR
      擴增 40循環 95 for 15 sec
      60
      for 60 sec
      60延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

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