百部染料法PCR鑒定試劑盒說明書

實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

產品及特點：
本產品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液，濃度為2×。具有快速簡便、靈敏度高、特異性強、穩定性好等優點，可大限度的減少人為誤差。使用時只需加入DNA模板和引物既可。使用方便快捷，能避免PCR操作過程中的污染，使用時只需取適量2×TaqPCR MasterMix溶液，加入模板和引物，并加入去離子水補足體積，使MasterMix溶液濃度為1×即可進行反應。使用前請保證充分溶解并混勻，操作需在冰上進行。本產品就是為此目的根據 PCR 原理開發的試劑盒。
具有高靈敏度、高特異性、高穩定性
可在同一個管子中高特異性的執行cDNA合成與基于探針的qPCR反應。更多優點如1.的特異性；2.多重反應（高通量）；3.反應體系配置，無需冰塊；4.無懼高GC含量PCR；5.預防交叉污染；6.廣泛的設備兼容性。
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
QGY-7701細胞，人肝癌細胞 人羊膜細胞,HA細胞 大鼠癌細胞;SHZ-88雷帕霉素/（標準品）Rapamycin(Sirolimus)質量規格：HPLC>98%,標準品

KG-1(人急性骨髓性白血病細胞) 5×106cells/瓶×2甲磺酸雷沙吉蘭Rasagiline Mesylate質量規格：>98.5%

Promocell C-25215 Hepatocyte Basal Medium (prf), 肝細胞基礎培養基，無酚紅 500ml白藜蘆醇Resveratrol質量規格：>97.0%,BR

人腎小管上皮細胞;HKC白藜蘆醇（標準品）Resveratrol質量規格：HPLC≥99%，標準品

ACO2 Others Human 人 ACO2 / Aconitase 2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 瑞替加濱堿Retigabine Base質量規格：含量>99.0%
HONE1細胞，人鼻咽癌細胞 小鼠瘤細胞,EL4.IL-2細胞 CM-H030人外周血白細胞*培養基100mL葉黃素; 二羥基-d-胡蘿卜素質量規格：UV>40%,BRXanthophyll

NG108-15(小鼠神經細胞瘤與大鼠神經膠質瘤之融合細胞) 5×106cells/瓶×2葉黃素; 二羥基-d-胡蘿卜素(標準品)質量規格：HPLC>85%,標準品Xanthophyll

Promocell C-26040 Placeal Epithelial CellGrowth Medium, 胎盤上皮細胞生長培養基(即用型) 500ml鋅試劑(≥85%（HPLC）)質量規格：≥85%（HPLC）Zincon

成纖維細胞培養基-2(用于心肌成纖維細胞)FM-21,3-二甲基-5-吡唑酮質量規格：0.961,3-Dimethyl-5-pyrazolone

PRAP1 Others Human 人 PRAP1 / Proline-rich acidic 人細胞裂解液 (陽性對照) 氟啶胺（標準品）質量規格：分析標準品Fluazinam
FGF18 Others Human 人 FGF18 / FGF-18 人細胞裂解液 (陽性對照) 槐屬苷(標準品)質量規格：HPLC≥98%,標準品Sophoricoside

小鼠視網膜神經節細胞*培養基 100mL槐屬苷質量規格：HPLC≥98%,BRSophoricoside

3T3-L1小鼠胚胎成纖維細胞 3T3-L1 mouse embryonic fibroblasts DMEM+10%FBS敵草索(標準品)質量規格：分析標準品 Dacthal

其他白細胞介素1-氯辛烷(標準品)質量規格：分析標準品1-Chlorooctane

人小腦星形膠質細胞( Hac) (1×106 ) 小鼠神經干細胞(EGFP標記) Mouse十二烷(標準品)質量規格：分析標準品,>99.7%(GC)Dodecane
百部染料法PCR鑒定試劑盒說明書NCI-H460 人肺癌細胞SB505124質量規格：>98%SB-505124

CL-0377LLC-WRC 256(大鼠腹水癌細胞)5×106cells/瓶×2NLG919質量規格：>98%,IDO抑制劑NLG-919

mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞維莫德吉(GDC0449)質量規格：>98%,hedgehog抑制劑Vismodegib;GDC-0449

人肺轉化細胞;AE1201 人肝竇內皮細胞*培養基 100mLZosuquidar；LY335979質量規格：>98%LY-335979

人主動