胡寧病毒核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）

訂購信息：
 產品名稱：胡寧病毒核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）
規格：50T
編號：BH-P96486
分類：熒光PCR法
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。

準備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產品說明書                                   1份
使用及效果：
產品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。

檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應體系配制如下表：
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。

長尾綠猴腎細胞;4647氧化鑭(>99%,EP)Lanthanum(III) oxide>99%,EP

TEK Others Human  Tie2 / CD202b / TEK 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 氯化鎂六水(分子生物學)Magnesium chloride, hexahydrate>99%,分子生物學級

CL-0217SP2/0(小鼠骨髓瘤細胞)5×106cells/瓶×2醋酸錳四水Manganese (II) acetate, tetrahydrate>98%,BC

LX-2, 肝星形細胞株 小鼠垂體瘤細胞(分泌促生長激素分泌激素)，GT1.1細胞 OK(負鼠(opossum)腎細胞)神經氨酸酶(≥10 units/ mg )Neuraminidase from Clostridium perfringens≥10 units/ mg

腎透明細胞腺癌細胞;786-O [786-0]乙酸鎳四水(>98%,BC)Nickel (II) acetate, tetrahydrate>98%,BC
小鼠成骨細胞*培養基 100mLDL-α-羥基戊二酸二鈉98%,GC,進分sigma 94577DL-α-Hydroxyglutaric acid di salt

P388D1小鼠樣瘤細胞 P388D1 mouse lymphoid tumor cells RPMI-1640(GIBCO)+90%馬血清+10%FBS地美溴胺>99%,BRDemecarium Bromide

IL12B Protein Human 重組 IL12B / P40 蛋白 (Fc 標簽)喹哪啶紅ARQuinaldine Red

腦微血管內皮細胞 (HBMEC) ( 5×105 ) 大鼠主動脈平滑肌細胞 細胞名稱(98%)>98%Phenolphthalein

CM-R057大鼠腎系膜細胞*培養基100mL四溴酚藍INDTetrabromophenol blue
胡寧病毒核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）293T細胞，胚腎T細胞 卵巢癌細胞,HO-8910細胞 心肌細胞裂解物HCML戈米辛D()＞98.0% (LC&T)，Gomisin D

SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-11-甲基>98%1-Methyl Xanthine

IFNA5 Others Human  IFNαG / IFNaG / Ierferon alpha-G 細胞裂解液 (陽性對照) 6-羧基-X-羅丹明>95%6-Carboxy-X- rhodamine; 6-ROX

豚鼠皮膚細胞;GP-S2西侖吉肽>97%,integrin抑制劑Cilengitide,EMD121974,NSC 707544

IFNA14 Others Mouse 小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 細胞裂解液 (陽性對照) 柴胡皂苷B2（）HPLC≥98%，Saikosaponin B2