嗜肺軍團菌核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）

訂購信息：
 產品名稱：嗜肺軍團菌核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）
規格：50T
編號：BH-P97223
分類：熒光PCR法
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。

準備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產品說明書                                   1份
使用及效果：
產品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。

檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應體系配制如下表：
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。

侵襲性脈絡膜色素瘤細胞;MuM-2C核苷酸膠體染料Green-DNA Dye,SYBR Green IBR

NCSTN Others Human  NCSTN / Nicasin 細胞裂解液 (陽性對照) D-葡萄糖無水D-Glucose>99.5%,分子生物學級

胚胎心肌組織來源細胞;CCC-HEH-2咪唑ImidazoleAR

ACE2 Others Rat 大鼠 ACE2 / ACEH 細胞裂解液 (陽性對照) L(+)-阿拉伯糖L(+)-Arabinose>98%,BR

NCI-H661 大細胞肺癌細胞去離子甲酰胺Formamide deionized>99%,分子生物學級
CL-0309TG-905(腦膠質母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2BOC-L-脯氨醇 >98%,BRBOC-L-Prolinol

HA Others H7N7 甲型流感 H7N7 (A/Netherlands/219/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 絲氨醇,2-氨基-1,3- >99%,BR2-Ami*,3-propanediol

神經元總RNAHN NAN-甲基-D-天>98%,BRN-Methyl-d-Aspartic Acid

SHG44細胞，膠質瘤細胞 SV-40轉化肺成纖維細胞,WI-38AV13細胞 膀胱成纖維細胞Many types of cells　5 × 105方(1ml)D->98%,BRD-Sorbitol

豹貓皮膚成纖維樣細胞;LCS5n-辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷(OGP)>98%,用于蛋白分析N-Octyl-β-D-glucopyranoside
嗜肺軍團菌核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）NELL2 Others Human  NELL2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 1-去甲 2-甲基格拉司瓊（格拉司瓊雜質A）美國進口1-Desmethyl 2-Methyl Granisetron (Granisetron Impurity A)

CM-R038大鼠肝內膽管上皮細胞*培養基100mL1-去甲 格拉司瓊（格拉司瓊雜質B）美國進口1-Desmethyl Granisetron (Granisetron Impurity B)

Ca Ski, 細胞 非洲綠猴腎細胞,CV-1(M)細胞 PA-1(卵巢畸胎瘤細胞)1-甲基吲唑-3-羧酸（格拉司瓊雜質D）美國進口1-Methylindazole-3-carboxylic Acid (Granisetron Impurity D)

小鼠T細胞;Cl.Ly1+2-/9endo-9-甲基-9-氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-胺（格拉司瓊雜質F）美國進口endo-9-Methyl-9-azabicyclo[3.3.1]nonan-3-amine ( Granisetron Impurity E)

NAALADL1 Others Human  NAALADL1 細胞裂解液 (陽性對照) 18-冠-6-(>98.0%(GC))>98.0%(GC)18-Crown 6-Ether