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      A375+EGFP人惡性黑色素瘤細胞+EGFP

      更新時間:2024-12-07

      簡要描述:

      A375+EGFP人惡性黑色素瘤細胞+EGFP公司正在出售的產品:人APP-PS1(M146L)雙基因轉染CHO細胞株;7WML6.0 小鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 AP180: 裝配銜接蛋白180抗體 人上皮細胞;Ca Ski 大鼠腸巨噬細胞培養基 100mL
      ACVRL1 Others Canine 狗 ALK1 / ACVRL1 人細胞裂解液 (陽性對照) 小鼠白介素2(IL-2

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      公司產品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!



      產品名稱

      規格

      貨號

      A375+EGFP人惡性黑色素瘤細胞+EGFP

      1×106

      P-X644

       


      1、細胞傳代:

      1)細胞生長至覆蓋培養瓶的 80%面積時,棄 25cm2培養瓶中的培養液,用 PBS 清洗細胞一次;

      2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入 5ml 培養

      液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;

      3)棄上清,沉淀細胞用 1-2ml 培養基重懸,然后按 1:2 比例進行分瓶傳代,最后放入 37℃,5%CO2細胞

      培養箱中培養;

      2、細胞凍存:

      1)細胞生長至覆蓋培養瓶的 80%面積時,棄 25cm2培養瓶中的培養液,用 PBS 清洗細胞一次;

      2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入培養液終

      止消化,輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;

      3)用適量的凍存液(

      FBS:DMSO=9 :1)重懸細胞,并放置于凍存管中;

      4)先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h 后轉入液氮中進行長期保存。使用程序

      降溫盒可直接放入-80℃。

      細胞

      3、細胞復蘇:

      1)從液氮中取出細胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具),快速將其置入 37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結

      晶,然后用 75%的酒精擦拭凍存管外壁;

      2)將凍存管中的細胞移至含 6ml 培養基的 15ml 離心管中, 1000rpm 離心 5min;

      3)棄上清,沉淀用 6ml 培養基重懸,接種 25cm2培養瓶,于 37℃,5%CO2細胞培養箱中培養;

      收到細胞后如何操作:

      1、首先,觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象。若有,請及時與我司技術支持聯系。

      2、用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于細胞培養箱內靜置培養,隔天再取出進行觀察。

      3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等。

      4、可將培養瓶內多余的培養基轉移至50ml無菌離心管中,備用;細胞傳代時,可以將該培養基按照一定比例和客戶自備的培養基混合使用,讓細胞逐漸適應培養條件。

      5、確認細胞狀態良好后,應及時將細胞凍存,再進行后續的實驗,避免后期實驗失誤可能發生細胞污染或死亡而導致的細胞丟失。

      6、建議客戶收到細胞后前3天,100X、200X、400X各拍3-5張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和我們技術支持溝通交流。

      細胞培養操作

      1) 復蘇細胞:以下細胞培養凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產品說明書為主。將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10 cm皿中,加入約8 mL培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

      2) 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。

          a、棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。        

          b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,使消化液浸潤所有細胞,將培養瓶置于37℃培養箱中消化1-2 min(視細胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加2-3ml培養基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養液后吹勻。        

           c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養基的新皿中或者瓶中,置于培養箱中培養。 3) 細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;a、收集細胞及細胞培養液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數。

           b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。  


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      公司正在出售的產品:

      LDB3 LIM結構域結合蛋白3抗體 CL-0073DH82(犬巨噬細胞)5×106cells/瓶×2

      FGF6 Protein Human 重組人 FGF6 / FGF-6 蛋白 大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體4(AIL-R4)ELISA試劑盒 Albumin /Cy3 熒光素Cy3標記 0.1ml

      LIMS2 ILK結合蛋白LIMS2抗體 CGB7 Others Human CGB7 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

      大鼠肝內膽管上皮細胞培養基 100mL 大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體4(AIL-R4)ELISA 試劑盒 AACT/Cy3 熒光素Cy3標記胰0.1ml

      LNK: 淋巴細胞特異性接頭蛋白抗體 QGY-7701, 人肝癌細胞 肝癌細胞,Hep3B細胞 Hs 578T(癌細胞)

      GTSE-1 G2/S期應答相關蛋白1抗體 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0907

      P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 人可溶性粘附分子(Sam)ELISA 試劑盒 Mycobacterium bovis 結核桿菌菌體蛋白 0.5mg

      GDF8: 生長分化因子8/肌肉抑制素抗體 AMY2A Others Cynomolgus 食蟹猴 AMY2A / Alpha-amylase 人細胞裂解液 (陽性對照)

      肺微血管內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) 人可溶性血小板內皮細胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA 試劑盒 AMH/MIS Muellerian抑制因子抗原 1mg

      phospho-GSK3 Alpha + Beta (Tyr279+Tyr216) 0酸化糖原合酶激酶3α/β抗體 家貓肺細胞;FCA-L2 肝細胞,QSG-7701細胞 BC3H1細胞,小鼠腦瘤細胞

      A375+EGFP人惡性黑色素瘤細胞+EGFP人喉癌上皮細胞;Hep-2 大鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA試劑盒 IFN- Beta/IFNB(Mouse Interferon Beta)  小鼠β干擾素 96T

      Pecanex: 山核桃素樣蛋白1抗體 貓腎細胞;CRFK

      人胚胎絨毛細胞(HAF)(1×106 ) 細胞名稱 種屬 大鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA 試劑盒 CCK  大鼠膽囊收縮素/腸促肽 96T

      phospho-PPAR alpha (Ser12) 0酸化α型-過氧化酶活化增生受體抗體 人虹膜色素上皮細胞總RNAHIPEpiC NA

      CD70 Protein Rat 重組大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (His 標簽) 大鼠解整合素樣金屬蛋白酶19(ADAM19)ELISA試劑盒 GM1(Human anti-ganglioside antibody)  人抗抗體 S100A6 Others Human S100A6 / CACY 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

      三、培養注意事項 

      1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象 發生請及時和我們聯系。

      2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需 細胞因子等,確保細胞培養條件一致,若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題,責任由 客戶自行承擔。

      3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題,部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現象。觀察好細胞狀態后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養箱放置 2-4h。

      4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,用新鮮的培養基重懸 細胞,并接種到新的培養瓶或培養皿中,置于培養箱中進行培養。

      5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。

      6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,告知細胞 的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

      7. 該細胞僅供科研使用。

      8. 備注:運輸用的培養基 (灌液培養基) 不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培 養條件新配制的培養基來培養細胞。     收到細胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。

      9. 注意:  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。



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